ИСТИНА

Лизоцим как бактериолитический фермент известен давно и широко используется в медицине и биотехнологии. Например, куриный лизоцим является действующим началом антисептического средства «Лизобакт» (таблетки для рассасывания) для лечения заболеваний полости рта и горла. Интерлейкин-2 является одним из ключевых цитокинов, регулирующих деятельность иммунной системы человека. Его используют как лекарственное средство для лечения сепсиса и онкологических заболеваний. Недавно нами было открыто, что интерлейкин-2 человека сам также обладает и прямой бактериолитической активностью. Физиологическая роль последнего факта требует дальнейших исследований, так как могут быть выявлены новые ранее неизвестные аспекты работы иммунной системы. С точки зрения медицинской прикладной науки весьма важно знать,какие вещества способны активировать различные бактериолитические агенты и, тем самым, повышать эффективность лизиса клеток бактерий под действием этих агентов. Знание о данных активирующих веществах могут помочь в создании новых высокоэффективных лекарственных препаратов. В настоящей работе нами было изучено действие лизоцима и интерлейкина-2 на различные бактериальные клетки в присутствии добавок различных веществ. В частности, в качестве активаторов были использованы физиологически активные вещества (таурин, тирамин, триптамин, милдронат), антибиотики (бацитрацин), аминокислоты (глицин, лизин, аргинин, глутаминовая кислота). В результате проведенного исследования выявлены как общие закономерности, так и существенные различия в действии добавок на бактериолитическую активность лизоцима и интерлейкина-2. При действии на клетки Escherichia coli, аргинин и глутамат, например, выступают как активаторы обоих бактериолитических факторов. Зависимости скорости лизиса от концентрации активатора в данном случае имеют гиперболический характер, максимальный активационный эффект достигается при концентрации аминокислот 10-15 мМ. Усиление лизиса под действием интерлейкина-2 достигает 200% для обеих аминокислот, для лизоцима активационный эффект аргинина гораздо сильнее, чем при использовании глутамата (200 и 100% соответственно). Аналогичное влияние на скорость лизиса оказывает и ЭДТА (гиперболическая активация, 200-250% активационного эффекта для обоих бактериолитических агентов), однако максимальный активационный эффект достигается при концентрациях, на порядок меньших (0.1-0.15 мМ). В некоторых случаях добавки физиологически активных веществ не оказывали влияния на скорость лизиса. При действии на Escherichia coli для интерлейкина-2 такими добавками являлись глицин и лизин, для лизоцима - милдронат. Таурин, тирамин и триптамин не оказывали активирующего эффекта в обоих случаях. Для ряда веществ характер зависимостей имел вид кривых с максимумом – первоначальное повышение скорости лизиса с увеличением концентрации активатора сменялось последующим снижением. Подобный эффект на клетках Escherichia coli для лизоцима проявлялся при использовании глицина (максимальный активационный эффект 100% при концентрации добавки 1 мМ), лизина (250% при 18 мМ), бацитрацина (80% при 10 мМ). Для интерлейкина-2 аналогичный характер зависимостей демонстрировали полимиксин (200% при 5 мМ), бацитрацин (150% при 3 мМ) и милдронат (150% при 3 мМ). Таким образом, проведенное исследование позволяет сделать вывод о том, что лизоцим и интерлейкин-2 человека имеют разный механизм бактериолитического действия. Данный вывод подтверждается разницей во влиянии различных добавок на скорость лизиса клеток бактерий под действием данных бактериолиических агентов. Если основными активаторами лизоцима являются глицин, лизин и глутамат, то для интерлейкина-2 это глутамат, аргинин и милдронат. Полученные в работе данные открывают возможность усиления действия эндогенных и экзогенных бактериолитических агентов в результате более эффективного сочетания лекарственных препаратов при применении существующих медикаментов, а также открывают новые пути при разработке новых фармацевтических препаратов.