ИСТИНА

Повышение активности теломеразы наблюдается примерно при 90% типов опухолевых поражений человека различного происхождения. Одна из причин - мутации в промоторе гена теломеразной обратной транскриптазы (TERT), возникающих в опухолевых клетках. Ранняя диагностика онкологических заболеваний является одним из ключевых факторов успешного лечения, в связи с чем возникает необходимость разработки новых подходов, основанных на определении опухолевых ДНК в биологических жидкостях. Одна из проблем - высокая степень деградации такой опухолевой ДНК. Это определяет необходимость обнаружения специфической опухолевой ДНК безамплификационным методом, обладающим низким пределом обнаружения и высокой клинической чувствительностью для определения низкой мутантной аллельной фракции. Спектроскопия гигантского комбинационного рассеяния (ГКР) резонансного усиления находит широкое применение для обнаружения целевых молекул, в том числе ДНК, в многокомпонентных смесях. Преимуществами метода являются низкий предел обнаружения на уровне фемтомолярных концентраций, отсутствие ограничений, связанных с амплификацией мишени. В данной работе были получены ГКР-активные коллоиды и планарные сенсоры на основе наночастиц серебра. Для специфической иммобилизации олигонуклеотида на наночастицах были синтезированы олигонуклеотидные последовательности. Для регистрации ГКР спектров использовали олигонуклеотидные последовательности-репортеры, содержащие в качестве ГКР-метки красители R6G и Сy3. Была установлена принципиальная возможность идентифицировать индивидуальные олигонуклеотидные последовательности методом ГКР по характеристическим рамановским сдвигам, а также продемонстрирована зависимость интенсивность сигналов при эквивалентных рамановских сдвигах в широком концентрационном диапазоне определяемых веществ.