ИСТИНА

Метилирование ДНК, осуществляемое ДНК-метилтрансферазами (МТазами), – одна из наиболее активно изучаемых эпигенетических модификаций, играющая важную роль в контроле экспрессии генов и правильном развитии клеток эукариот. Мтаз существует несколько типов: Dnmt1, ответственная за копирование рисунка метилирования материнской цепи в каждом раунде репликации, Dnmt2, и Dnmt3a и Dnmt3b, отвечающие в комплексе с Dnmt3L за установление рисунка метилирования на ДНК. Все МТазы имеют в своем строении десять консервативных мотивов в С-концевом каталитическом домене, необходимых для правильной работы ферментов. За время жизни клетки МТазами создается особый рисунок метилирования, нарушения которого являются признаками заболеваний. В частности, при развитии лейкемии наблюдается общее гипометилирование с локальным гиперметилированием. В настоящий момент известно, что у 25% пациентов мутации наблюдаются именно в гене Dnmt3a, и именно они приводят к нарушениям рисунка метилирования. Однако на сегодняшний день подробно изучено немного мутаций в Dnmt3a, которые связаны со значимыми аминокислотными остатками в МТазе, и наблюдаются при развитии заболевания. Например, показано, что замена аргинина в положении R882 приводит к 80% инактивации фермента, замена R786 приводит к полной потере активности фермента и неспособности образовывать переходный комплекс, и замена R788 – к заметному снижению каталитической активности фермента. Изучение мутаций, напрямую связанных с нарушением работы фермента, позволит лучше понять роль аминокислотных остатков в механизме метилирования. Целью данной работы стало изучение ранее не освещенной мутации S124 в каталитическом домене мышиной Мтазы Dnmt3a. Серин 124 расположен рядом с IV высококонсервативным мотивом, а также у людей, страдающих лейкемией, часто встречается мутация S714, соответствующая 124 положению в каталическом домене мышиного фермента, что суммарно может указывать на его важную роль в механизме.