ИСТИНА

Одним из возможных способов борьбы с антибиотикорезистентными штаммами яв- ляется модифицирование молекул известных антибактериальных лекарственных средств (ЛС). Создание новых полиморфных модификаций известных ЛС, несущих изменения кристаллической структуры, размера молекулярных агрегатов и показателей раствори- мости и стабильности, является возможным благодаря методу криомодифицирования. В ходе криомодифицирования может осуществляться нагрузка молекул ЛС наноразмерны- ми частицами (НЧ) тяжелых металлов, что приводит к получению полиморфных компо- зитов на основе молекул ЛС, содержащих активные в отношении бактериальных клеток металлы. В данной работе проводится микробиологическая диагностика полиформных модификаций антибиотических ЛС : диоксидина, гентамицина, метронидазола, нагру- женных НЧ серебра или меди. Испытание ЛС проводится in vitro − на микроорганизмах (МО) и/или in vivo - биологический метод, на лабораторных животных. Известные мето- ды in vitro: (1) диско-диффузионный, (2) таблеточно-диффузионный, (3) луночно- диффузионный метод, (4) метод серийных разведений ЛС, (5) кинетический метод опре- деления Ki (метод «острых опытов»), (6) люминесцентный (фотонный), (7) микроскопи- ческий. Методы имеют достоинства, недостатки и ограничения. Наиболее распростра- ненными является группа диффузионных методов. Их достоинства - доступность, крат- косрочность, наглядность, дешевизна. Недостатки диффузионных методов: условная размерность (разница между контролем и опытом в размере зоны задержки роста в мм); необходимость статистической оценки достоверности; зависимость от условий экспери- мента. Кинетический метод позволяет получать количественную размерность, содержа- тельность, сравнимость. Недостатки – бóльшая трудоемкость. Ограничения – только для растворимых веществ, рост МО только в жидкой среде. Методы различны по чувстви- тельности, глубине «проникновения» в познания механизмов действия на тестовых МО. Кинетический метод выявляет «узкие места» в метаболизме МО. Работа проводилась на спектре бактерий, включающем микроорганизмы, классифицируемые как условные па- тогены и различающиеся по важным цито-морфологическим признакам: Escherichia coli 52, Staphilococcus aureus 144, Pseudomonas aeruginosa 47, Mycobacterium cyaneum 98. Приведены результаты определения АА упомянутых ЛС. Основным методом в работе при определении АА являлся диффузионный метод с применением различных носителей ЛС – дисков фильтровальной бумаги, полимерных гелей на основе альгината, альбумина, хитозана, таблеток из прессованного ЛС. Приведены результаты применения кинетиче- ского метода определения АА ЛС (метод острых опытов), позволяющего получать кон- станты ингибирования (Ki) исследуемого ЛС. Дается способ статистического анализа получаемых результатов (t-критерий Стьюдента), позволяющий оценивать значимость различий между модифицированными и контрольными препаратами. Выявлены разли- чия в действии ЛС в отношении перечисленных организмов. На действие модифициро- ванных ЛС также как и на действие исходных форм ЛС оказывают влияние такие факто- ры как концентрация раствора ЛС, тип металла, которым нагружается ЛС, метод получе- ния НЧ металла, способ получения носителя ЛС. Для всесторонней оценки используе- мых методов модификации ЛС необходимо расширение спектра тестируемых микроор- ганизмов. Работа при поддержке гранта РНФ № 16-13-10365.