ИСТИНА

Культуры клеток высших растений представляют значительный интерес для исследования процессов образования и накопления вторичных метаболитов. Объектом нашего исследования была культура клеток женьшеня Panax japonicus var repens, которая является продуцентом характерных для интактных растений данного рода тритерпеновых гликозидов — гинзенозидов. Методом ВЭЖХ-МС был проведен количественный анализ более 32 различных гинзенозидов в биомассе суспензионной культуры, выращенной при исключении кинетина из стандартного состава среды культивирования. Несмотря на то, что добавление экзогенных цитокининов часто является необходимым условием для поддержания роста культур клеток растений, для исследуемого штамма, на среде без кинетина были отмечены более высокие значения показателей роста, чем на стандартной среде с кинетином. Суммарное содержание гинзенозидов в среднем составляло около 80 мг/г сухой массы и при исключении из состава среды кинетина значимо не изменилось. Основной вклад в общее содержание гинзенозидов (более 80% от суммы гликозидов) вносили «кислые» (со свободной карбоксильной группой) гинзенозиды — малонильные производные гинзенозидов группы протопанаксадиола (Rb 1 , Rb 2 /Rb 3 , Rc, Rd) и глюкурониды олеаноловой кислоты (гинзенозид R0, псевдогинзенозид RT1, чикусетсусапонин IVa), а также «нейтральные» гинзенозиды Rg1 и Rb1. Выращивание на среде без кинетина привело к значительному увеличению количества чикусетсусапонина IVa. Его среднее содержание на 21 сутки цикла роста культуры на среде без кинетина составило 34±8 мг/г сух.массы (44% от суммы всех гинзенозидов), в то время как в контроле — 3,9±1,7 мг/г сухой биомассы (5% от суммы). Кроме того, наблюдалось увеличение содержания некоторых гинзенозидов группы протопанаксатриола (гинзенозид Rf и нотогинзенозид R2), в то время, как содержание Rg1 и Re не изменилось. Cодержание в биомассе гинзенозидов группы протопанаксадиола (как «нейтральных» форм, так и малонилированных производных), напротив, значительно снизилось (с 40% до 13% от общего содержания гинзенозидов). Настоящая работа показывает, что полное исключение экзогенных цитокининов из среды культивирования суспензионной культуры клеток Panax japonicus var repens не приводит к снижению ростовых и биосинтетических параметров культуры, однако влияет на количественное соотношение между индивидуальными тритерпеновыми гликозидами.