ИСТИНА

Мукоадгезивные полимеры являются основным компонентом систем доставки лекарств в органы, имеющие слизистые оболочки [1]. Муцин – гликопротеин массой более 1000 кДа, является основным компонентом секретов слизистых оболочек [2]. Муцины рассматриваются в качестве мукоадгезивных носителей для доставки терапевтических агентов. Изучение взаимодействия муцина и бактериолитических ферментов является важной задачей для разработки антибактериальных препаратов. Изучено взаимодействие муцина из поджелудочной железы свиньи и лизоцима из куриных яиц. Для проведения исследования использовали комплекс физико-химических методов: УФ спектроскопия, динамическое рассеяние света, флуоресцентная спектроскопия. Обнаружено ингибирующее действие муцина на лизоцим при концентрациях 0.3 - 3 мг/мл, при концентрациях 0.005 – 0.2 мг/мл муцин на активность фермента не влияет. Активность лизоцима определяли по скорости изменения мутности суспензии клеток Micrococcus lysodeikticus c A450 0.7 единиц в натрий-фосфатном буфере (СNaCl 137 мM, CKCl 2.7 мM, CNa2HPO4 10 мM, CKH2PO4 1.76 мM, pH 7,4) при 37°С в присутствии различных концентраций муцина (0.005-3 мг/мл). Установлено, что ингибирование активности лизоцима муцином происходит по неконкурентному типу. Для этого исследовали зависимость активности лизоцима от концентрации субстрата при нескольких концентрациях лизоцима (0, 0.5 и 1.5 мг/мл) и спрямляли полученные зависимости в координатах Лайнуивера-Берка. Для исследования связывания муцина с Micrococcus lysodeikticus исследовали зависимость дзета-потенциала клеточной суспензии от содержания муцина. В суспензии клеток (-30 мВ) с увеличением концентрации муцина происходит увеличение дзета-потенциала до значений, равных дзета-потенциалу муцина в водной среде (-15 мВ), что свидетельствует о наличии связывания муцина с клетками. Для исследования связывания муцина с лизоцимом регистрировали спектры флуоресценции ФИТЦ-меченого лизоцима в смеси с муцином (0.1, 0.3, 1.0 мг/мл) и без него. Обнаружено, что с увеличением концентрации муцина происходит уменьшение интенсивности флуоресценции ФИТЦ-меченого лизоцима. Это подтверждает образование комплекса муцина с лизоцимом. Таким образом, можно заключить, что при взаимодействии муцина с лизоцимом происходит образование комплекса, при этом происходит измерение активности и структуры фермента.