ИСТИНА

Противоопухолевый белок DR5-B на основе цитокина TRAIL индуцирует апоптотическую клеточную гибель, специфично связываясь с рецептором смерти DR5 на поверхности опухолевых клеток. Ранее была разработана методика экспрессии и очистки рекомбинантного белка DR5-B в клетках E.coli. В рамках настоящей работы была разработана генетическая конструкция, кодирующая гибридный белок DR5-B с пептидом iRGD на С-конце. Пептид iRGD специфически связывается с интегринами αvβ3 и αvβ5, гиперэкспрессированными на поверхности опухолевых клеток, после чего претерпевает протеолитическую активацию и приобретает аффинность к рецептору NRP-1, участвующему в ангиогенезе. На основе полученной генетической конструкции гибридный белок был экспрессирован в растворимой клеточной фракции в штамме E.coli SHuffle B. Были подобраны условия экспрессии и очистки методами аффинной и ионобменной хроматографии. Цитотоксическая активность полученного белка была подтверждена методом МТТ на различных линиях опухолевых клеток и 3D моделях опухолевых сфероидов in vitro. Было показано, что гибридный белок DR5-B-iRGD быстрее и эффективнее проникает в сфероидные структуры опухолевых клеток. Биспецифическое воздействие на различные сигнальные пути, участвующие в развитии опухолей, с помощью гибридного белка DR5-B-iRGD является перспективным направлением противоопухолевой терапии.