ИСТИНА

Piwi-зависимая РНК-интерференция является одним из основных механизмов подавления активности мобильных генетических элементов у эукариот. В настоящее время эта система подробно исследована как у дрозофилы, так и у других модельных объектов, включая нематоду и мышь. Однако, несмотря на описание механизма осуществления piРНК-интерференции, в настоящее время остаётся много вопросов касательно деталей этого процесса. Основными источниками piРНК являются как одиночные транспозоны, так и большие скопления мобильных генетических элементов, именуемые кластерами piРНК. В настоящее время известно два типа кластеров: одноцепочечные (20A и flamenco у дрозофилы) и двуцепочечные (42AB и 38С у дрозофилы). Большинство кластеров дрозофилы работают в клетках зародышевого пути, а их транскрипты поступают в околоядерную область Nuage, где подвергаются процессингу, в ходе которого образуются гетеродуплексы с транскриптами транспозонов, что приводит к подавлению активности последних. Считается, что транскрипция таких кластеров зависит от продуктов генов dead, rhi и cuff, которые участвуют связывании РНК-полимеразы с неканоническими стартами транскрипции. Более того, продукты этих трёх генов препятствуют сплайсингу, поэтому в клетках присутствует некоторое количество как сплайсированных, так и несплайсированных транскриптов этих кластеров. Считается, что flamenco, в отличие от других кластеров, экспрессируется исключительно в соматических тканях яичников, и его процессинг не зависит от продукта гена rhi. Транскрипты данного кластера подвергаются альтернативному сплайсингу и последующему нарезанию в жёлтом теле на поверхности мембраны митохондрий, откуда направляются в составе белка PIWI в качестве гидовых РНК обратно в ядро. Однако в нашей лаборатории ранее было показано, что у линии с фенотипом flamenco понижена экспрессия гена rhi и наблюдается повышенное соотношение сплайсированных и несплайсированных форм траскриптов кластера flamenco в сравнении с диким типом. В данной работе мы измерили относительную экспрессию различных мобильных генетических элементов, сплайсированных и несплайсированных форм кластеров flamenco и 42AB, а также разных транскриптов кластеров 20A и 38С в соматических и генеративных тканях гибридов с инактивацией гена rhi с помощью системы si-РНК-интерференции. В результате мы увидели повышение транскрипции некоторых мобильных генетических элементов не только в генеративных тканях, но и в соматических. Это позволяет предположить, что некоторые мобильные генетические элементы могут регулироваться системой piРНК-интерференции не только в половых, но и в соматических клетках. Также мы обнаружили изменение отношения количества сплайсированных и несплайсированных транскриптов кластеров flamenco и 42AB не только в тканях яичников, но и тканях головы и каркаса. Это указывает на то, что flamenco, как и остальные кластеры piРНК, регулируется с помощью продукта гена rhi, а кластер 42AB работает не только в яичниках, но и за пределами генеративных тканей.