ИСТИНА

Разработка систем культивирования фолликулов яичника in vitro, является одной из первоочередных целей вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ). Применение таких систем может позволить сохранить фертильность людям, страдающим от различных видов гормон-зависимых раков (в том числе рака молочной железы), а также многих аутоиммунных заболеваний (например, васкулитов), для лечения которых применяются методы, негативно влияющие на состояние половых клеток [1]. При моделировании подобных систем применяют овариальные фолликулы мыши [2]. В ходе настоящей работы были использованы фолликулы, выделенные из яичников неполовозрелых мышат в возрасте 22 дней. Полученные фолликулы инкапсулировали в альгинатный гидрогель c концентрацией 0,75%, после чего осуществляли их индивидуальное культивирование в среде для роста фолликулов (α-MEM, эмбриональная телячья сыворотка, инсулин-трансферрин-селенит, гентамицин, фолликулостимулирующих гормон, L-карнитин) при температуре +37оС, в атмосфере 5%СО2/воздух. Инкапсуляцию фолликулов осуществляли путём полимеризации альгинатного гидрогеля с помощью ионов кальция. На 7-й день культивирования фолликулы помещали в среду созревания (α-MEM, эмбриональная телячья сыворотка, инсулин-трансферрин-селенит, гентамицин, фолликулостимулирующий гормон, хорионический гонадотропин человека, эпидермальный фактор роста, L-карнитин). На 8й день из фолликулов выделяли ооциты и помещали их в среду созревания. Нами было показано, что в подобранных условиях культивирования осуществляется рост фолликулов. Добавление эпидермального фактора роста в среду созревания способствует инициации разрешения мейоза. Среди ооцитов, полученных в результате культивирования овариальных фолликулов in vitro, 45% выделили первое редукционное тельце. Также было показано, что возможно оплодотворение полученных ооцитов, а также их развитие до стадии двух бластомеров. Однако, ооциты, выделенные из фолликулов после культивирования в подобранных условиях, имеют меньший диаметр по сравнению с ооцитами, полученными в естественном цикле и при стимуляции овуляции. Существующие методики позволяют добиться роста овариальных фолликулов и формирования в них зрелых ооцитов. Однако полученные в ходе культивирования фолликулов in vitro ооциты имеют меньший размер и пониженную компетентность к оплодотворению. Поэтому дальнейшая оптимизация систем культивирования овариальных фолликулов in vitro имеет большое значение для развития технологий ВРТ. Filatov M.A., Khramova Y.V., Kiseleva M.V., Malinova I.V., Komarova E.V., Semenova M.L. Female fertility preservation strategies: cryopreservation and ovarian tissue in vitro culture, current state of the art and future perspectives // Zygote. 2016. No. 5. P. 635-653. Filatov M.A., Khramova Y.V., Semenova M.L. In Vitro Mouse Ovarian Follicle Growth and Maturation in Alginate Hydrogel: Current State of the Art // Acta Naturae. 2015. No. 2. P. 48-56.