ИСТИНА

Микрореология крови и ее микроциркуляция обусловлены составом плазмы крови, деформируемостью и взаимодействием клеток крови, в частности, агрегацией эритроцитов и взаимодействием между клетками крови и эндотелием. Эндотелиальные клетки (ЭК), покрывающие стенки сосудов, играют важную роль в регулировании кровотока, а также влияют на свойства клеток крови через выделяемые ими сигнальные молекулы газотрансмиттеров, в частности, оксида азота (NO). Цель работы – измерение силы взаимодействия между одиночными эритроцитами и ЭК, а также агрегации эритроцитов в цельной крови в микроканалах при различных концентрациях фибриногена и газотрансмиттера NO. В работе использовался лазерный пинцет, позволяющий манипулировать отдельными клетками без механического контакта, а также измерять силы взаимодействия эритроцитов и ЭК in vitro. Способность эритроцитов агрегировать в микроканалах измерялась с помощью метода диффузного светорассеяния на цельной крови. ЭК выделяли из пупочной вены человека (HUVEC) и выращивали при 37 градусах цельсия в среде диоксида углерода на круглых стеклышках с образованием монослоя клеток, которые помещались в плазму крови с концентрацией фибриногена 0 - 8 мг/мл. Для стимуляции продукции NO ЭК инкубировали с раствором L-аргинина в различных концентрациях 0 – 1000 мкМ. Было показано, что сила взаимодействия между эритроцитами и эндотелием растет с увеличением концентрации фибриногена и достигает насыщения при 4 мг/мл достигая величины 4 пН, что сопоставимо с силами взаимодействия между эритроцитами. Инкубация эндотелиальных клеток с L-аргинином приводит к снижению силы агрегации эритроцитов при концентрациях L-аргинина до 100 мкМ и ее росту при последующем увеличении концентрации. Метод лазерного пинцета можно применять для оценки взаимодействия эритроцитов и эндотелиоцитов, а также агрегационных свойств эритроцитов в микроканалах с эндотелием. Представленные результаты важны для понимания влияния эндотелия сосудов на микрореологию и микроциркуляцию крови.