ИСТИНА

Несмотря на то, что геном человека полностью прочитан, полный набор функциональных открытых рамок считывания (ОРС) остается неясным. Среди них определение функциональных малых ОРС, состоящих менее чем из 100 кодонов, представляет собой серьезную научную проблему.1 Из множества малых ОРС особое внимание привлекают вышележащие ОРС, которые расположены в 5’-нетранслируемых областях матричных РНК (мРНК). Вышележащие ОРС могут регулировать трансляцию in cis, а также кодировать небольшие функциональные белки (микробелки). Около половины мРНК млекопитающих содержат вышележащие ОРС, но их функции во многом остаются недостаточно изученными. Данные рибосомного профилирования позволили нам отобрать почти тысячу высококонсервативных вышележащих ОРС в мРНК человека. Мы проводили обширный отбор вышележащих ОРС по пролиферации клеток с использованием системы CRISPR/Cas9. Мы подтвердили трансляцию нескольких вышележащих ОРС посредством эндогенного мечения, включая мишень в гене PRPF19. Последующие эксперименты указывают на то, что вышележащая ОРС в PRPF19 может кодировать микробелок или регулировать трансляцию мРНК PRPF19. Отбор вышележащих ОРС позволил нам определить ряд мишеней, которые играют важную роль в пролиферации клеток человека. Отобранные мишени могут регулировать экспрессию генов на уровне трансляции или кодировать функциональные микробелки. Работа выполнена при финансовой поддержке РНФ, проект 23-14-00058.