ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ФНКЦ РР |
||
Устойчивость к программируемой гибели клеток (ПГК) является одним из главных признаков злокачественной трансформации клеток. Митотическая катастрофа (МК) изначально определялась как один из видов клеточной гибели инициированный аберрантным митозом. Дальнейшие исследования показали, что МК не является отдельной формой гибели клетки, а скорее стадией предшествующей клеточной гибели, после которой наблюдается апоптоз или некроз в зависимости от молекулярного фона клетки. В нашей работе МК была индуцирована в клетках рака прямой кишки HCT116 дикого типа и нокаутного по 14-3-3 сигма белку (σ-/-) сублетальными дозами цитотоксических агентов доксорубицина (600 нМ) и кольцемида (0,1 мкг/мл). Для выявления путей ПКГ после развития МК были произведена оценка экспресии одного из маркеров апоптоза, расщепленной формы PARP. В клетках HCT дикого типа появление фрагментов PARP было более выражено после обработки кольцемидом в сравнении с доксорубицином и увеличивалось со временем после индукции МК. В клетках HCT116 σ-/- эффект развивался раньше, чем в клетках дикого типа, при обработке кольцемидом. В процессе анализа последствий МК было обнаружено, что клеточный стресс, вызываемый кольцемидом и доксорубицином, может вызывать не только апоптоз, но и аутофагию. Дальнейший анализ выявил накопление второй формы белка LC3 и расщепление p62 в обеих клеточных линиях. Причем аутофагия была более выражена в клетках HCT116 σ-/-. Оба процесса, апоптоз и аутофагия, регулируются балансом про- и анти-апоптотических белков семейства Bcl-2. Поэтому мы исследовали влияние белков семейства Bcl-2: Bcl-XL и Mсl-1на развитие апоптоза и аутофагии после индукции МК в клетках HCT116 дикого типа и HCT116 σ-/-. При стимуляции МК уровень апоптоза в клетках клетках HCT116 дикого типа и HCT116 σ-/- с повышенной экспрессией Bcl-XL-GFP и Mcl-1-YFP снижался. В то же время, трансфекция с Bcl-XL и Mсl-1 стимулировала аутофагию в обеих клеточных линиях. Таким образом, подавление апоптоза вызванное повышенной экспрессией белков Bcl-XL и Mсl-1 при индукции МК значительно стимулировало аутофагию в клетках HCT116 дикого типа и HCT116 σ-/-. Полученные данные, доказывают, что стимулирование МК может приводить к двум процессам ПКГ: аутофагии и апоптозу. Для клеток с более высоким уровнем МК, преобладающим путем клеточной гибели будет аутофагия. Таким образом, развитие аутофагии при стимуляции МК может стать новым подходом для повышения эффективности противоопухолевой терапии.