|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ФНКЦ РР |
||
Характеристика и контроль качества препаратов пептидов, используемых для получения активной фармацевтической субстанциидипломная работа (Специалист)
- Научные руководители: Родин Игорь Александрович, Колесанова Е.Ф.
- Автор: Вахренев Роман Геннадиевич
- Тип: Специалист
- Организация, в которой проходила защита: МГУ имени М.В. Ломоносова
- Год защиты: 2020
- Аннотация: В последние годы лекарственные препараты на основе пептидов всё чаще используются в клинической практике. На 2019 год более 400 пептидных препаратов находятся на различных стадиях клинических испытаний и более 60 уже одобрены для применения в медицине. Этим обусловлена необходимость в разработке методик анализа с целью контроля качества препаратов пептидной природы, поскольку при регистрации препарата на рынке одним из требований является наличие информации о содержании побочных, потенциально вредных для человека веществ ниже установленного предела. Каждый новый синтезированный пептид обладает уникальным набором физико-химических свойств, поэтому для каждого пептида требуется разработка критериев оценки качества препарата на основе этих свойств, чем и обуславливается научная новизна данной работы – для пептида необходимо получить результаты анализов, которых нет ни в одной существующей базе данных. Целью данной работы являлась разработка методик контроля качества iRGD-пептидов (iRGD-пептиды, конъюгированные с бактериофагом MS2, используются для направленной доставки ионов таллия, вызывающего апоптоз опухолевых клеток), полученных методом твёрдофазного пептидного синтеза, согласно фармакопейным требованиям. В работе была предложена методика подтверждения подлинности пептидного препарата методом обращённо-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (ОФ-ВЭЖХ) с ультрафиолетовым-фотометрическим (УФ) и масс-спектрометрическим (МС) детектированием. Получены результаты для двух iRGD-пептидов, подтверждающие соответствие молекулярных масс пептидов заявленным. Разработан способ подтверждения аминокислотной последовательности методом тандемной масс-спектрометрии с предварительным разрушением дисульфидной связи и последующим окислением остатков цистеина до цистеиновых кислот для обоих пептидов, показано соответствие аминокислотных последовательностей заявленным на основе масс-спектров фрагментации однозарядных и двухзарядных ионов iRGD-пептидов. Отсутствие примесей пептидной природы подтверждено методом ОФ-ВЭЖХ-УФ-МС путём сравнения хроматограмм по полному ионному току и УФ-хроматограмм образцов с аналогичными хроматограммами холостого опыта. Также отсутствие наиболее вероятных побочных продуктов проверено путём сравнения хроматограмм по выделенным ионам с массами возможных примесей образцов и холостых опытов. Для определения доли пептида в препарате проведён аминокислотный анализ одного из iRGD-пептидов, результаты анализа показали долю пептидного материала в препарате на уровне 80%, которая определена усреднением полученных результатов для трёх аминокислот (аргинин, глицин, лизин).
- Добавил в систему: Родин Игорь Александрович