|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ФНКЦ РР |
||
Ингибирование поли(АДФ-рибоза)-полимераз производными гуанина в культивируемых клетках крысы разного типадипломная работа (Специалист)
- Научный руководитель: Щербакова Татьяна Анатольевна
- Автор: Смирновская Мария Сергеевна
- Тип: Специалист
- Организация, в которой проходила защита: МГУ имени М.В. Ломоносова
- Год защиты: 2023
- Аннотация: На примере культур клеток феохромоцитомы крысы PC12 и кардиомиобластов крысы Н9с2 предложен оригинальный экспериментальный подход для исследования эффективности и селективности действия ингибиторов поли(АДФ-рибоза)-полимераз в отношении клеток разного фенотипа. Он основан на одновременном тестировании ингибиторов в препаратах живых и пермеабилизованных клеток, что позволяет оценить вклад фактора распределения ингибитора между внешней и внутренней средами клетки на эффективность его действия. Определены оптимальные условия получения пермеабилизованных клеток посредством их обработки дигитонином, а также условия для проведения количественного иммунофлуоресцентного анализа активности поли(АДФ-рибоза)-полимераз в живых и пермеабилизированных клетках РС12 и Н9с2. Определена концентрация эндогенного НАД+ в клетках РС12 и Н9с2 и произведен расчет кажущейся константы Михаэлиса для реакции поли(АДФ-рибозил)ирования в пермеабилизированных клетках РС12. Проведена оценка эффективности ингибиторного действия 7-метил-8-оксигуанина, по показателям IC50 и Ki. В работе установлено, что обнаруженная экспериментально различная эффективность ингибиторного действия исследуемых веществ в клетках преимущественно обусловлена различиями в характере распределения ингибиторов между внутренней и внешней средами клетки.
- Добавил в систему: Щербакова Татьяна Анатольевна