|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ФНКЦ РР |
||
Выделение, очистка и функциональное исследование рекомбинантного белка Est3p теломеразного комплекса Saccharomyces cerevisiae.дипломная работа (Специалист)
- Научные руководители: Зверева М.Э., Донцова О.А.
- Автор: Шаранов Юрий Сергеевич
- Тип: Специалист
- Организация, в которой проходила защита: МГУ имени М.В. Ломоносова
- Год защиты: 2004
- Аннотация: 1. С помощью биоинформатических подходов в структуре полноразмерного белка Est3p – компонента теломеразного комплекса дрожжей Saccharomyces cerevisiae был найден актин-связывающий мотив I/LWEQ. 2. Укороченный ген EST3 и полноразмерный с измененным участком сдвига рамки считывания были клонированы в ряд экспрессирующих векторов. Получены продуценты рекомбинантного белка Est3p на основе прокариотической системы E. coli и эукариотической системы P. pastoris. 3. При экспрессии рекомбинантного укороченного гена EST3 в P. Pastoris трансляция во внешнюю среду, которая должна протекать в выбранной системе, не происходит, что по видимому, связано с возможно имеющимися структурными особенностями укороченного Est3p, выявленными в рамках компьютерного предсказания вторичной структуры этого белка. 4. Разработана методика выделения и очистки рекомбинантного белка укороченного Est3p для получения поликлональных антител против этого белка. 5. Отработаны условия получения полноразмерного Est3p в растворимой форме при выделении его из E. coli, что открывает прекрасную возможность для структурного исследования этого белка методом спектроскопии ЯМР. 6. Предсказанная способность полноразмерного Est3p взаимодействовать с актином подтверждена экспериментально с помощью специальных in vitro тестов.
- Добавил в систему: Зверева Мария Эмильевна