Роль обратимо гликозилируемых полипептидов RGP1 и RGP5 Nicotiana benthamiana во взаимодействии между вирусом табачной мозаики и растениемкурсовая работа (Специалист)
Аннотация:Обратимо гликозилируемые полипептиды (reversibly glycosylated polypeptides, RGP) -
это семейство белков, идентифицированных во многих видах растений. RGP делят на
два класса: белки класса 1 обладают мутазной активностью и катализируют превращение UDP-L-арабинопиранозы в UDP-L-арабинофуранозу; RGP класса 2 не обладают
мутазной активностью, а выполняют структурную роль. RGP играют важную роль в
процессах роста и развития и действуют кооперативно. Также показано, что эти белки участвуют в ответных реакциях на вирусную инфекцию: распространение инфекции
вируса табачной мозаики (ВТМ) в Nicotiana tabacum было затруднено при суперэкспрессии RGP2, в то время как подавление экспрессии RGP1-3 приводило к стимуляции
межклеточного распространения ВТМ. Механизм противовирусного действия RGP в
отношении инфекции ВТМ не известен, поэтому целью данной работы является выявление роли RGP во взаимоотношениях между растением и ВТМ на модельном объекте
Nicotiana benthamiana. Показано, что RGP1:GFP локализуется в клетке в ассоциации с мембранами аппарата Гольджи, но при ко-экспрессии с RGP5 его локализация меняется на
цитоплазматическую: RGP1:GFP перераспределяется равномерно по периферии клетки. Сам
по себе RGP5:GFP локализуется в цитоплазме и накапливается в ядре, но при совместной
экспрессии с RGP1 флуоресцентный сигнал из ядра пропадает, а RGP5:GFP локализуется только в цитоплазме. Метод бимолекулярной комплементации флуоресценции показал, что RGP1 и ТБ взаимодействуют в клетке. При этом образуя скопления, но при добавлении RGP5 к этой паре распределение их в клетке становится равномерным, агрегаты исчезают.
Таким образом, показано, что RGP5 оказывает влияние на локализацию как RGP1, так
и комплекса RGP1/ТБ, взаимодействуя с RGP1 и стабилизируя его.