|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ФНКЦ РР |
||
Роль чувствительных к метанолу генов в sink-source переходекурсовая работа (Специалист)
- Научный руководитель: Комарова Т.В.
- Автор: Попов Я.В.
- Тип: Специалист
- Организация, в которой проходила защита: МГУ имени М.В. Ломоносова
- Кафедра: Факультет биоинженерии и биоинформатики
- Год защиты: 2014
- Курс: 2
- Аннотация: Во время своего развития листья растения претерпевают sink-source переход: незрелые листья, которые являются реципиентами фотоассимилятов (sink-листья), становятся их донорами (source-листья). Sink-source модификация сопровождается многими процессами, одним из которых является изменение межклеточного транспорта за счёт ветвления плазмодесм, что приводит к снижению их пропускной способности. Работа плазмодесм регулируется в том числе метанолом, сигнальной молекулой растений. Метанол испускается листьями, причём в sink-листьях больше, чем в source-листьях. С помощью метода супрессионной вычитающей гибридизации ранее был идентифицирован ряд генов Nicotiana tabacum, меняющих свою активность в sink-source переходе[1]. Среди них оказались чувствительные к метанолу гены sieve element occlusion protein (SEO) и salicylic acid binding catalase (SABC). SEO - семейство генов репарации ситовидных элементов; SABC - ген каталазы, связывающей салициловую кислоту. Т.к. гены SEO и SABC чувствительны к метанолу, который способен регулировать межклеточный транспорт, то естественным образом возникает предположение, что гены SEO и SABC могут быть вовлечены в регуляцию межклеточного транспорта. В процессе sink-source перехода принимает участие пектинметилэстераза (ПМЭ), деметилирующая пектин клеточной стенки растений и образующая метанол, тем самым модифицируя клеточную стенку, которую пронизывают плазмодесмы. Показано, что содержание мРНК ПМЭ в sink-листьях более чем в 2 раза превосходит уровень мРНК ПМЭ в source-листьях. Поскольку ПМЭ генерирует метанол, влияющий на экспрессию генов, а в том числе и генов SEO и SABC, и принимающий участие в созревании клеточной стенки, то необходимо оценить его активность в sink- и source-листьях. Таким образом, целью данного исследования является изучение влияния генов SEOII и SABC на межклеточный транспорт и оценка активности ПМЭ в sink- и source-листьях. Для достижения поставленной цели необходимо решить следующие задачи: (1) получить кДНК SEOII и SABC из Nicotiana tabacum; (2) создать конструкции, содержащие гены SEOII и SABC под контролем 35S-промотора в бинарном векторе для экспрессии в растительной клетке; (3) провести агроинфильтрацию Nicotiana benthamiana бактериями, несущими полученные конструкции; (4) оценить влияние SEOII и SABC на интенсивность межклеточного транспорта в растении; (5) измерить активность ПМЭ с помощью гель-диффузионного теста (ПМЭ-теста).
- Добавил в систему: Комарова Татьяна Валерьевна