ИСТИНА

1) Впервые произведена успешная экспрессия растительных ФДГ из A.thaliana и G.max в клетках E.coli в активной растворимой форме 2) Произведено систематическое исследование термостабильности ФДГ из 6 различных источников при разных значениях рН и состава среды с помощью различных подходов: 1) изучение кинетики термоинактивации, 2) исследование спектров кругового дихроизма и 3) анализ кривых плавления с помощью дифферен¬циальной сканирующей калориметрии. Все три подхода дали аналогичные результаты. Показано, что термостабильность каждого из 6 изученных ферментов имеет сугубо индивидуальный характер и в зависимости от температуры, рН и состава среды различия в стабильности могут составлять два и более порядков. 3) С использованием высокоэффективной системы экспрессии отлажена методика получения больших количеств ФДГ для последующей кристаллизации. Получены новые трехмерные кристаллические структуры различных форм ФДГ из Pseudomonas sp.101, Moraxella sp.C1 и A.thaliana. Практическая значимость работы 1) Данные, полученные при комплексном изучении термостабильности ФДГ из различных источников позволяют оптимизировать промышленное применение этих ферментов, путем подбора подходящего фермента для использования в конкретных условиях; 2) Более низкие по сравнению с другими ФДГ значения констант Михаэлиса ФДГ из G.max по NAD+ и формиату делают этот фермент очень перспективным для регенерации NAD(P)H в процессах тонкого органического синтеза хиральных соединений.