ИСТИНА

Впервые амплифицирован и секвенирован участок генома вируса мозаики георгина, содержащий часть межгенного спейсера (700 пн), промотор и 7-ю открытую рамку считывания. Проведен сравнительный анализ нуклеотидных последовательностей промоторов ВМГ и ВКГГ с промоторами других каулимовирусов. Показано распространение вируса мозаики георгина на территории г. Уфы и окрестностей. Впервые для получения одноцепочечной ДНК промоторов каулимовирусов использована ДНК полимераза фага рhi 29. Получены химерные последовательности промоторов каулимовирусов методом ДНК шаффлинга. Химерные формы промоторов, также как и природные промоторы вирусов кольцевой гравировки гвоздики и мозаики георгина, показали высокий уровень экспрессионной активности в клетках E.coli, A.tumefaciens, протопластах и трансгенных растениях N.tаbacum. Показано, что для проявления полной экспрессионной активности промотора вируса кольцевой гравировки гвоздики достаточно последовательности размером 370 пн. На трансгенных растениях табака была выявлена конститутивная экспрессия с промоторов ВМГ и ВКГГ и они не проявили тканеспецифичности. При анализе экспрессионной активности с помощью субстратов x-gluc и 4-MUG, промоторы вируса мозаики цветной капусты и вируса мозаики георгина показали примерно одинаковую активность, а промотор вируса кольцевой гравировки гвоздики оказался менее эффективным.