![]() |
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ФНКЦ РР |
||
Способ получения ингибитора коллагеназы с противоопухолевым действием из гепатопанкреаса камчатского краба, предусматривающий гомогенизацию сырья в 0.1 М ацетате аммония, содержащем 0.1-1 мМ ацетата кальция при рН 6.4-7.0, центрифугирование гомогената с получением супернатанта, добавление к супернатанту сульфата аммония до 60-70%-ного насыщения, отделение осадка через 20 ч центрифугированием, растворение осадка в дистиллированной воде с добавлением 0.1-1 мМ ацетата кальция до получения истинного раствора, очистку и концентрирование на поливолоконной мембране с размером пор 100 кДа, двукратную промывку дистиллированной водой с последующим прогреванием супернатанта до 60-100 0С в течение 25 мин, отделение осадка центрифугированием, растворение получаемого суммарного препарата ингибитора в 0.05 М трисовом буфере с рН 7.0-8.0, хроматографию на колонке с аффинным сорбентом - аргинин силохромом с последующей элюцией активных ферментов трисовым буфером с добавлением 1 М NaCl и 20% изопропилового спирта, упариванием фракции, содержащей ингибитор на роторном испарителе при 60-80 0С в течение 40-60 мин, концентрирование ультрафильтрацией на мембране с размером пор 30-50 кДа, промывание концентрата, содержащего целевой продукт, 0.01 М раствором хлористого натрия и лиофильное высушивание с получением целевого продукта.