![]() |
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ФНКЦ РР |
||
Изобретение относится к биотехнологии. В частности, к способу получения рекомбинантного мутантного цитохрома с лошади. Данный способ осуществляют введением мутаций К27Е/Е69К/К72Е/К86Е/К87Е/Е90К или К8Е/Е62К/Е69К/К72Е/К86Е/К87Е, или К8Е/К27Е/Е62К/Е69К/К72Е/К86Е/К87Е/Е90К с помощью метода сайт-направленного мутагенеза, в ген цитохрома с лошади, который находится в составе плазмидной ДНК pBPCYCS/3. Далее проводят трансформацию штамма Escherichia coli JM-109 полученной рекомбинантной плазмидной ДНК, экспрессию и выделение целевого белка с помощью катионообменной и адсорбционной хроматографии. Изобретение позволяет использовать рекомбинантный мутантный цитохром с лошади в качестве тест-системы для измерения скорости генерации супероксида в мембранных препаратах. 3 ил. Изобретение относится к области биохимии, молекулярной биологии и биотехнологии. Может быть использовано для измерения скорости генерации супероксида в мембранных препаратах (микросом, митохондрий), обладающих цитохром с-редуктазной и цитохром с-оксидазной активностью, а также в медицинской биохимии для исследования роли супероксида в патогенезе нейродегенеративных заболеваний.