ИСТИНА

Ген ras1 является одним из первых известных протонкогенов, для которого хорошо изучена роль в канцерогенезе. Протоонкоген ras при нарушении функционирования и постоянной экспрессии непрерывно передает сигнал на МАР-киназный каскад. К аналогичным последствиям может приводить гиперэкспрессия гена и нарушение нормальной своевременной инактивации информационной РНК данного гена RISK комплексом . Может ли нарушение экспрессионной активности гена приводить к аналогичным эффектам? На сегодняшний день данные об экспрессии гена ras1 не полны и противоречивы. С применением метода ChIP-chip анализа для Drosophila melanogaster было показано взаимодействие семи транскрипционных факторов (prd, Dref, vvl, dzi, zen, abd-A, Dfd) с промоторной областью гена Dras1. Промоторный район у дрозофил изменчив и у удаленных видов Drosophila не наблюдается строгой гомологии по позициям связывания данных транскрипционных факторов. Для эволюционно удаленных видов также высоко полиморфной оказывается и 3`-некодирующая область. У гена Dras1 в данной области был выявлен консервативный фрагмент, находящийся между позициями 185 и 255 от конца экзона 3, который проявляет высокую гомологию к сайтам связывания 6 микроРНК (miR-310 - miR-313, miR-92a, miR-92b). Наши данные предполагают неслучайное сохранение высокой гомологии в районе 3` UTR. Данная работа имеет целью проверить гипотезу об участии микроРНК в регуляции экспрессионной активности у Drosophila.

The role of microRNA in regulation of ras1 protooncogene expression in Drosophila melanogaster as the model object

Будут получены трансгенные конструкции на основе Р-элемента с репортерным геном, содержащие и не содержащие область связывания микро РНК. Подтверждение функциональной роли анализируемого эволюционно консервативного участка как сайта связывания микро РНК. Подтверждение роли микро РНК в возрастно- и тканеспецифичной регуляции гена Dras1. Подтверждение взаимодействия изучаемой последовательности транскрипта с микро РНК.

Проведен анализ эволюционно консервативных участков промоторной области, 5`- и 3`-нетранслируемых областей гена Dras1 у дрозофил разной степени филогенетической близости (в списке основных публикаций (4.7) пункты 1, 3-7, 11,13, 15,16). Последовательности гена Dras1, включая интроны и регуляторные области у 11 близкородственных видов дрозофил группы virilis были получены впервые. Анализ полученных данных показал неравномерную скорость накопления изменчивости в кодирующей области, последовательности интронов и области промотра гена (пункты 2, 4, 8-10, 14, 16). Показано смещение точки инициации транскрипции гена Dras1 у дрозофил группы virilis по сравнению с Drosophila melanogaster (пункты 12, 17). У видов разной степени филогенетической близости, в том числе у 11 близкородственных видов дрозофил группы virilis с помощью биоинформационого анализа в последовательности гена ras1 были определены сайты связывания с микроРНК (рис. 1, 2) и транскрипционными факторами (пункты 13, 18).