ИСТИНА

Одним из ключевых свойств живого организма является способность поддерживать гомеостаз тканей за счет сложно регулируемого баланса между гибелью и обновлением клеток. Существенные нарушения этих процессов происходят при старении, что по данным многочисленных исследований связано, в первую очередь, с накоплением в различных тканях т.н. сенесцентных, или стареющих, клеток (senescent cells) (Lopez-Otin, 2013). Клеточное старение в виде остановки клеточного цикла и приобретения ряда специфических признаков, таких как ассоциированные со старением изменения секретома клеток (senescence-associated secretory phenotype, SASP) и др., многими исследователями рассматривается в качестве направленной на предупреждение онкогенеза защитной реакции организма на накопление мутаций и снижение активности систем репарации ДНК в активно делящихся клетках. Несмотря на то, что процесс клеточного старения является необходимым для обновления тканей и их заживления после повреждений, избыточное накопление сенесцентных клеток приводит к активации хронического асептического воспаления, дисфункции тканей и в итоге к развитию возраст-ассоциированных заболеваний (Childs, 2017; Kirkland, 2017). В настоящее время активно разрабатываются подходы к селективной элиминации сенесцентных клеток с помощью сенолитиков – препаратов, действующих через различные механизмы преимущественно на стареющие клетки (Kirkland, 2017; Jeon, 2017). Кроме того, в ряде работ показано, что контроль за содержанием сенесцентных клеток и даже реверсия сенесцентного состояния могут быть достигнуты путем изменения микроокружения стареющих клеток в нужном направлении. Однако механизмы такого влияния изучены недостаточно, что определяет актуальность исследований в этой области. Для оценки вклада сенесцентных клеток в развитие организменного старения и патогенез возраст-ассоциированных заболеваний необходимы релевантные и надежные биомаркеры таких клеток (Matjusaitis, 2016). Одним из наиболее изученных биомаркеров сенесцентных клеток является экспрессия белков ингибиторов клеточного цикла, в первую очередь, р16/INK4a, а также р21, р53 и др. (Baker, 2016; Kirkland, 2017) Согласно данным некоторых исследователей, этот биомаркер может быть определен и в системном кровотоке путем оценки уровня экспрессии р16 (в виде белка или мРНК) в CD3+ фракции Т-лимфоцитов периферической крови, и этот показатель статистически значимо коррелирует как с возрастом пациентов, так и с некоторыми распространенными факторами риска возраст-ассоциированных заболеваний, такими как курение, например (Liu, 2009). Среди других распространенных биомаркеров клеточного старения используются активность фермента бета-галактозидазы как в клетках, так и в плазме крови (Spazzafumo, 2017), длина теломерных участков хромосом и активность теломеразы (Sahin, 2012), эпигенетические изменения, а также оценка содержания в среде культивирования ряда секретируемых клетками факторов. Для успешной трансляции в клинику подходов, направленных на регуляцию содержания сенесцентных клеток в различных тканях, необходимо изучение взаимосвязей между установленными клиническими биомаркерами старения и развития возраст-ассоциированных заболеваний, включая, в частности, различные параметры состояния сосудистой стенки, системными показателями старения (такими как уровень отдельных цитокинов и факторов роста в крови, включая IL-6, MCP-1, активин А, IGF1, остеопонтин) и биомаркерами стареющих клеток на тканевом и клеточном уровнях. На решение этих вопросов направлено предлагаемое исследование.

Будет разработан план ПНИ. Будут начаты набор пациентов разного возраста, оценка у них клинических биомаркеров старения и забор биоматериала (периферическая кровь, кожа, подкожная жировая клетчатка), выделение клеток и подготовка срезов для гистологического анализа; отработаны методики оценки различных биомаркеров сенесцентных клеток в тканях. У пациентов будут изучены клинические, системные, тканевые и клеточные биомаркеры накопления сенесцентных клеток, проведен анализ взаимосвязей между этими показателями.Будет оценено влияние различных подходов, направленных на регуляцию содержания сенесцентных клеток, включая использование сенолитиков, на клетки пациентов. По итогам полученных результатов будут разработаны рекомендации по методам оценки эффективности таких подходов.