ИСТИНА

Целью настоящей работы является улучшить непосредственные и отдаленные результаты лечения пациентов с высокозлокачественными саркомами мягких тканей путем персонализации и интенсификации периоперационного лечения.

Soft tissue sarcomas, chemotherapy, combined treatment of sarcomas, preoperative therapy, histological subtype The object of the study is soft tissue sarcomas. The aim of this work is to improve the immediate and long-term results of treatment of patients with high-grade soft tissue sarcomas by personalizing and intensifying perioperative treatment. In accordance with the purpose, the objectives of the study are formulated: 1) to identify certain histological forms of soft tissue sarcomas sensitive to certain modes of preoperative chemotherapeutic treatment; 2) to introduce intraoperative marking of resection edges and postoperative pathomorphological assessment into daily clinical practice; 3) expand the indications for postoperative chemotherapy by studying the pathomorphosis and the effect of previous treatment; 4) by regrouping patients to choose the most effective regimens for postoperative chemotherapy; 5) to substantiate and introduce into clinical practice the principles of a personalized approach to the treatment of soft tissue sarcomas. The novelty of the work – the use of a prediction scale based on therapeutic pathomorphosis, pathoanatomic edge and many other parameters allowed us to identify a group of patients with an unfavorable prognosis and will further improve the results of therapy.

Анализ молекулярно-генетических нарушений

Персонализированный подход был применен в лечении 251 пациентов. С различными типами сарком мягких тканей: Плеоморфная саркома, Липосаркома, Синовиальная саркома, Эпителиоидная саркома, Миксоидная липосаркома, Злокачественная шваннома, Дерматофибросаркома, Лейомиосаркома, Экстраскелетная саркома Юинга, Светлоклеточная саркома, Эпителиоидная ангиосаркома. Для 206 образцов были получены переживающие культуры и проведена оценка чувствительности опухолевых клеток к химиотерапевтическим препаратам с использованием высокочувствительной АТФ- люминометрии. Параллельно с анализом хеморезистентности для каждого образца выполнялся цитологический анализ состава популяции клеток после культивирования в подобранных нами условиях, который подтвердил, что доля опухолевых клеток практически во всех получаемых суспензиях превышает 90%. Для всех них был проведен анализ экспрессии генов множественной лекарственной устойчивости (YB-1, MDR1, MVP, BCRP, P-gp). Было установлено, что экспрессия исследованных генов не коррелировала с устойчивостью к препаратам, за исключением ABCB1, для которого обнаружена слабоотрицательная корреляция с устойчивостью к доцетакселу и комбинации доцетаксела с гемцитабином. Экспрессия MVP слабоположительно коррелировала с устойчивостью к доцетакселу. Это, по всей видимости, свидетельствует, что приобретенная опухолевыми клетками устойчивость к основным химиопрепаратам, применяющимся при СМТ, не связана с ABC- транспортерами. MDR1, потенциальный маркёр резистентности к химиотерапии (субстратам Pgp), выявляется достаточно редко, для таких больных дальнейшие курсы ХТ могут быть малоэффективны и необходимо рассмотреть другие возможности терапии СМТ. Экспрессия PDGFR, мишень пазопаниба, выявлена в ряде ex vivo образцов сарком, учитывая доказанную эффективность пазопаниба при распространенной СМТ, эти данные могут быть использованы для назначения последующих курсов таргетной терапии. При анализе уровня экспрессии VEGF-1 в опухолевых клетках, полученных от 25 пациентов и культивируемых в условиях нормоксии и гипоксии, был выявлен ряд первичных культур СМТ, демонстрирующих повышенную продукцию VEGF-A и/или гиперчувствительность к гипоксической стимуляции этого фактора, что может быть основанием для назначения анти-VEGF терапии. Для 28 образцов опухолей с различной чувствительностью к препаратам в тесте in vitro был проведен экзомный анализ, направленный на выявление молекулярно-генетических нарушений, обуславливающих прогрессию опухолевого роста. К настоящему моменту удалось выявить статистически значимую отрицательную корреляцию между резистентностью к доксорубицину и мутациями в генах сигнальных путей GLI и Hedgehog. У пациента 19 также обнаружена вариация rs114014734, характеризуемая как «Breakpoint_for_insertion_to_form_EWS- FEV_fusion». Химерный ген EWSR1-FEV обнаружен в саркоме Юинга, но охарактеризован недостаточно. С другой стороны, ни один из существующих алгоритмов прямого поиска химерных элементов не позволил выявить подобной структуры. Для 20 образцов различных типов СМТ был изучен уровень экспрессии более чем 13 генов, относящихся к ключевым сигнальным путям, вовлеченным в опухолевую прогрессию - mTOR, PI3K/Akt, ERK 1/2, AMPK. Было показано, что в большинстве образцов СМТ обнаруживается высокий уровень как экспрессии гена mTOR, так и присутствия киназы mTOR в активированной форме. В значительном количестве случаев также выявлена экспрессия киназы Akt, являющейся вышележащим эффектором mTOR. Экспрессия ABCG2 была проанализирована в 39 образцах. Пороговое значение составляло 1%, что связано с тем, что ABCG2 экспрессируется в стволовых опухолевых клетках, которые являются минорной популяцией. Всего было выявлено 90 (приблизительно 44%) образцов с экспрессией выше этого значения. Был установлена слабоотрицательная корреляция между уровнем экспрессии Pgp и чувствительностью клеток к Доксорубицину (r = - 0.42; p = 0.017), с чувствительностью/резистентностью к другим препаратам уровни экспрессии Pgp или ABCG2 не коррелировали. Так же не было найдено корреляций между уровнем экспрессии мРНК генов ABCB1 и ABCG2 и белков Pgp и ABCG2, соответственно. Также не было обнаружено разницы по экспрессии Pgp и ABCG2 в группах, различающихся по полу, возрасту, стадии заболевания, степени злокачественности, наличию химио/радиотерапии, и ответа на лечение. Применение данной методики и практическая значимость позволяет увеличить количество органосохранных операций, а также в будущем, подобрать правильную таргетную терапию. В соответствии с этим можно улучшить качество жизни всех пациентов.