|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ФНКЦ РР |
||
Разработка условий кристаллизации ферментов углеводного обмена из E.coli (фруктозо-1,6-бисфосфатальдолазы и 5-кето-4-дезоксиуронатизомеразы) НИР
- Руководитель НИР: Назарова Т.И.
- Участники НИР: Воробьева Н.Н., Курилова С.А., Родина Е.В.
- Подразделение: Научно-исследовательский институт физико-химической биологии имени А.Н.Белозерского
- Срок исполнения: 1 сентября 2011 г. - 25 октября 2012 г.
- Номер договора (контракта, соглашения): №1313.11.20 от 1.09.2011 г.
- Тип: Разработка
- Приоритетное направление научных исследований: другое
-
Рубрики ГРНТИ:
- 29.19.19 Методы исследования кристаллической структуры и динамики решетки
- 31.23.27 Пептиды, белки
- 31.27.15 Структура и функции биополимеров
- 89.57.15 Задачи и программы исследований Земли из космоса
-
Ключевые слова:
космический эксперимент, кристаллизация
-
Описание:
Основным объектом НИР являются ферменты углеводного обмена, которые эволюционно сходны в бактериях и эукариотах. Для понимания функциональных особенностей этих ферментов необходимо получить их кристаллическую структуру высокого разрешения. Исследуемые белки углеводного обмена из E.coli, фруктозо-1,6-бисфосфатальдолаза (FbaB) и 5-кето-4-дезоксиуронатизомераза (KduI), до сих пор практически не были охарактеризованы. Для FbaB и его бактериальных гомологов структура неизвестна. В рамках НИР эти белки были получены генно-инженерным методом, очищены, сконцентрированы и закристаллизованы. Были подобраны условия кристаллизации методом встречной диффузии в капилляре, который подходит для выращивания кристаллов в условиях микрогравитации (на международной космической станции).
-
Основные результаты:
Исследованные белки были закристаллизованы в наземных условиях и на МКС в рамках Госконтракта между ИК РАН и ФГУП ЦНИИмаш на выполнение ОКР "Наука-ИК" по теме "Разработка предложений в программы НПИ на РС МКС по направлению "Физико-химические процессы и материалы в условиях космоса". Подготовка и проведение сеансов КЭ "Кристаллизатор" в основных экспедициях 2011-2012 гг. Обработка результатов КЭ "Кристаллизатор", проведенных в 2010-2012 гг. на аппаратуре JAXA-PCG". Кристаллизация на МКС позволила получить кристаллы FbaB и KduI более высокого дифракционного качества.
- Добавил в систему: Родина Елена Валерьевна
Источник финансирования НИР
| Хоздоговор, ОКР "Наука-ИК" |
Этапы НИР
| # | Сроки | Название |
| 1 | 1 сентября 2011 г.-25 ноября 2011 г. | Поиск и оптимизация условий кристаллизации фруктозо-1,6-бисфосфатальдолазы класса I из E. coli и ее комплексов с лигандами. Наработка белковых препаратов |
| Результаты этапа: Наработаны прнепаративные количества рекомбинантной фруктозо-1,6-бисфосфатальдолазы (FbaB). Предложены условия кристаллизации, позволяющие получить кристаллы нативной FbaB, пригодные для съемки в условиях микрогравитации. | ||
| 2 | 1 января 2012 г.-25 ноября 2012 г. | Разработка методики получения, выделения и очистки 5-кето-4-дезоксиуронатизомеразы из E. coli. Наработка белковых препаратов |
| Результаты этапа: Разработана методика выделения и очистки рекомбинантной 5-кето-4-дезоксиуронатизомеразы E.coli (KduI), наработано препаративное количество белка. Предложены условия кристаллизации комплекса KduI с одним из субстратов (глюкозо-6-фосфатом, или G-6-P), пригодные для получения кристаллов методом встречной диффузии в капиллярах. Эти условия предложено использовать для получения кристаллов в условиях микрогравитации. | ||
Прикрепленные к НИР результаты
Для прикрепления результата сначала выберете тип результата (статьи, книги, ...). После чего введите несколько символов в поле поиска прикрепляемого результата, затем выберете один из предложенных и нажмите кнопку "Добавить".