ИСТИНА

В рамках исследований по проекту были получены новые данные для решения основной задачи проекта – получения полной характеристики особенностей развития аудиогенного судорожного припадка с использование крыс линии КМ и крыс двух новых линий «0» и «4». На крысах линий «0» и «4» было показано, что метил-обогащенная диета (МОД) матери в период беременности и в первую неделю после родов (влияющая на уровень метилирования ДНК) вызвала у самцов и самок этих линий в возрасте 4,5 мес снижение интенсивности и увеличение латентного периода аудиогенного судорожного припадка, а также повлияла на постиктальную каталепсию у крыс линии «0» в условиях выработки аудиогенного киндлинга. Влияние МОД было более четко выражено у крыс линии «0». Показано, что МОД вызвала изменение уровня метилирования нескольких генов, в частности генов, активных в период эмбрионального развития. Неонатальное введение препарата вальпроевой кислоты (депакина в форме таблеток) вызвало усиление каталепсии у взрослых животных линии КМ , не повлияв на интенсивность аудиогенных судорожных припадков. В то же время неонатальное введение галоперидола усилило интенсивность этих судорог у крыс линии КМ. Введение взрослым крысам линии КМ трипептида pro-gly-pro (глипролина) снизило степень повреждений сосудов головного мозга, которые можно у них спровоцировать при длительном действии звука по специальной схеме. После введения глипролина была также выявлена тенденция к снижению внутричерепных кровоизлияний у крыс. Выявлены незначительные, но однонаправленные различия в предрасположенности к аудиогоенным судорогам между мышами-нокаутами по митохондриальному гену р66 Srh и мышами «дикого типа», что подтверждает данные о влиянии антиоксидантной системы на аудиогенные судороги. Использование в данном проекте набора генетических линий крыс позволяет исследовать закономерности эпилептогенеза при высоком (КМ), среднем (линия «4») и низком («0») уровнях судорожной готовности, что является ценным инструментом для экспериментальной эпилептологии.

В рамках исследований по проекту были получены новые данные по физиологическим свойствам судорог при аудиогенной эпилепсии (АЭ), с использованием крыс линии КМ, а также крыс ряда других генотипов, в частности крыс новых линий «0», селектируемой в на отсутствие предрасположенности к АЭ и линии «4», в которой идет отбор на высокую интенсивность АЭ. Субконвульсивная доза коразола (40 мг/кг) не вызвала судорог у крыс сублинии «0»(но вызвала их у большей части крыс КМ). У крыс «0» после коразола действие звука вызвало типичный приступ АЭ. Введение метафита (агонист NMDA-рецепторов) крысам линии «0» также вызывало у них интенсивные припадки АЭ. Регистрация стволовых акустических вызванных потенциалов у крыс КМ во время приступа АЭ (возможная благодаря новой методической разработке) выявило различия в динамике изменения их компонентов во время приступа АЭ. Описана потеря реактивности акустических структур ствола на «пике» приступа АЭ и сразу после его окончания. Метил-обогащенная диета (МОД) самок линий «0» и «4» в период беременности и в первую неделю после родов (влияющая на уровень метилирования ДНК) вызвала у их потомства в возрасте 4,5 мес снижение интенсивности и увеличение латентного периода припадка АЭ, а также изменила у крыс линии «0» пост-иктальную каталепсию в условиях выработки аудиогенного киндлинга. Влияние МОД было более четко выражено у крыс линии «0». МОД вызвала изменение уровня метилирования нескольких генов, в частности генов, активных в период эмбрионального развития. Проанализированы отдаленные эффекты неонатального введения галоперидола, леветирацетама (0.5-1 г/кг) и кофеина (100 мкг/кг), препаратов вальпроата натрия (разные дозы), а также гипертермии детенышей в неонатальный период. Были выявлены достоверные изменения в параметрах припадков АЭ, в частности, появление судорог в положении «на спине», а также аномально мощная акустическая стартл-реакция. При этом в большинстве случаев отдаленные эффекты выразились в снижении интенсивности припадка АЭ. Это было особенно заметно после однократной гипертермии новорожденных – и интенсивность АЭ, и изменения поведения свидетельствовали о снижении и уровня возбудимости, и тревожности. Выявлено незначительное, но устойчивое преобладание проявлений АЭ у мышей-нокаутов по митохондриальному гену р66 Srh (в сравнении с «диким типом»). Это подтверждает ранее полученные данные о влиянии антиоксидантной системы на АЭ. Эксперименты по хроническому (свободный выбор) и острому (в.б. инъекции) эффектам этанола у крыс КМ и и «0» показали отсутствие коморбидности в предрасположенности к АЭ и к потреблению алкоголя. Нарушения мозгового кровообращения у крыс КМ при длительной экспозиции действию звука по специальной схеме позволило оценить защитные эффекты адаптации к длительному введению нитрита натрия, как донора молекул NO, введения трипептида pro-gly-pro и стресса иммобилизации. Во всех случаях и смертность, и степень нарушений мозгового кровообращения у крыс КМ были достоверно снижены. Конкретные результаты по оценке интенсивности АЭ при разных неонатальных воздействиях (неонатальные инъекции, гипертермия, МОД), а также анализ реакций взрослых животных и на фармакологические препараты, и на физические факторы, позволяют утверждать информационную ценность данной генетической модели (набора линий крыс с разным уровнем предрасположенности к АЭ). Эти модели необходимы для разработки новых подходов к коррекции патологических неврологических состояний, в том числе генетически детерминированных.