Молекулярные механизмы и генетический контроль деления цианобактерий и хлоропластовНИР

Источник финансирования НИР

грант РФФИ

Этапы НИР

# Сроки Название
1 1 января 2008 г.-31 декабря 2008 г. Молекулярные механизмы и генетический контроль деления цианобактерий и хлоропластов
Результаты этапа: Начато комплексное структурно-функциональное исследование мутантов по клеточному делению Ftn2 и Ftn6 цианобактерии Synechococcus sp. PCC 7942 с применением методов ТЕМ, DAPI-окрашивание, Western гибридизации, иммунолокализации. Показано, что мутанты по клеточному делению обладают плейотропными изменениями, выявляемыми при анализе структуры их клеток методами ТЕМ. Среди структурных изменений можно отметить нарушения ригидности клеточных покровов, наличие усиленного пептидогликанного слоя (ПГС) с продукцией сетчато-фибриллярного вещества, изменения в структуре тилакоидов, уменьшение количества карбоксисом и изменение их структуры. Методы Western гибридизации и иммунолокализации белка GroEL позволили подтвердить результат протеомного исследования (Koksharova et al., 2007), согласно которому уровень этого шаперона возрастает в мутантных клетках. У мутантов шаперон локализуется главным образом в мембранных структурах клетки. Начата работа по инактивации 14 генов, кодирующих белки, уровень которых изменен в мутантах по клеточному делению Ftn2 и Ftn6 Synechococcus sp. PCC 7942, согласно проведенному нами ранее протеомному исследованию (Koksharova et al.,2007). Проведен компьютерный анализ баз данных с целью обнаружения соответствующих гомологов в геномах растений. Обнаружены растительные гомологи для восьми цианобактериальных генов. С помощью новых танспозонных мутантов идентифицированы шесть новых генов цианобактерий, контролирующих клеточное деление. Проведен поиск соответствующих гомологов в геномах растений. Начато получение инсерционных мутантов цианобактерий с целью подтверждения их природы.
2 1 января 2009 г.-31 декабря 2009 г. Молекулярные механизмы и генетический контроль деления цианобактерий и хлоропластов
Результаты этапа: Продолжено комплексное структурно-функциональное исследование мутантов по клеточному делению Ftn2 и Ftn6 цианобактерии Synechococcus sp. PCC 7942 с применением методов трансмиссионной электронной микроскопии, сканирующей микроскопии, негативного окрашивания. Показано, что мутанты по клеточному делению обладают плейотропными изменениями, выявляемыми при анализе структуры их клеток методами ТЕМ. Гены Ftn2 и Ftn6 цианобактерии Synechococcus sp. PCC 7942 клонированы в векторе экспрессии pAWG1.1 для последующей экспрессии соответствующих белков в клетках цианобактерии и идентификации их белковых партнеров. Продолжена работа по инактивации генов, кодирующих белки, уровень которых изменен в мутантах по клеточному делению Ftn2 и Ftn6 Synechococcus sp. PCC 7942, согласно проведенному нами ранее протеомному исследованию (Koksharova et al.,2007). Проведен компьютерный анализ баз данных с целью обнаружения соответствующих гомологов в геномах растений. Обнаружены растительные гомологи для девяти цианобактериальных генов. С помощью новых танспозонных мутантов идентифицированы шесть новых генов цианобактерий, контролирующих клеточное деление. Проведен поиск соответствующих гомологов в геномах растений. Получены инсерционные мутанты по двум из шести генов с целью подтверждения их природы.
3 1 января 2010 г.-7 декабря 2010 г. Молекулярные механизмы и генетический контроль деления цианобактерий и хлоропластов
Результаты этапа: Проведено комплексное структурно-функциональное исследование мутантов по клеточному делению Ftn2 и Ftn6 цианобактерии Synechococcus sp. PCC 7942 с применением методов трансмиссионной электронной микроскопии, сканирующей микроскопии, негативного окрашивания. Показано, что мутанты по клеточному делению обладают плейотропными изменениями, выявляемыми при анализе структуры их клеток методами ТЕМ. Проведена имунолокализация шаперона GroEL в клетках мутантов по клеточному делению.Сконструирована система для измерения и анализа газообмена СО2 клетками цианобактерий в непрерывном режиме с помощью газоанализатора, с выводом данных на компьютер. Гены Ftn2 и Ftn6 цианобактерии Synechococcus sp. PCC 7942 клонированы в векторе экспрессии pAWG1.1 для последующей экспрессии соответствующих белков в клетках цианобактерии и идентификации их белковых партнеров. Проведена работа по инактивации нескольких генов, кодирующих белки, уровень которых изменен в мутантах по клеточному делению Ftn2 и Ftn6 Synechococcus sp. PCC 7942, согласно проведенному нами ранее протеомному исследованию (Koksharova et al.,2007). Проведен компьютерный анализ баз данных с целью обнаружения соответствующих гомологов в геномах растений. Обнаружены растительные гомологи для восьми цианобактериальных генов. С помощью новых танспозонных мутантов идентифицированы шесть новых генов цианобактерий, контролирующих клеточное деление. Проведен поиск соответствующих гомологов в геномах растений. По результатам проведенных исследований опубликовано 17 работ, 1 статья принята в печать и 1 статья подготовлена к печати.

Прикрепленные к НИР результаты

Для прикрепления результата сначала выберете тип результата (статьи, книги, ...). После чего введите несколько символов в поле поиска прикрепляемого результата, затем выберете один из предложенных и нажмите кнопку "Добавить".