![]() |
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ФНКЦ РР |
||
На первом этапе мы исследовали действие митохондриально-направленного антиоксиданта SkQ1 на процесс заживления кожных полнослойных резаных ран у мышей линии C57BLKS-Leprdb/J (db/db) с наследственным ожирением и диабетом 2ого типа, а так же у старых (24 месяца) мышей линии CBAxC57bl/6. В обеих моделях длительный прием SkQ1 в дозе 250 нмоль/кг веса в сут. вызывал достоверное ускорение заживления ран. На ранних стадиях ранозаживления в области раны у мышей db/db и у старых мышей было выявлено значительное усиление нейтрофильной инфильтрации в области раны. Прием SkQ1 в обеих моделях вызывал снижение этого показателя до уровня, характерного для молодых здоровых животных. Одновременно под действием SkQ1 в ране значительно повышалось содержание макрофагов, сниженное у диабетических и старых мышей. Гистологический анализ показал, что в обеих моделях приём SkQ1 вызывал практически 3-х кратное увеличение толщины грануляционной ткани, накопление в ней миофибробластов, образование зрелых, регулярно ориентированных пучков коллагеновых волокон и значительное повышение объемной плотности сосудов. SkQ1 вызывал так же ускорение эпителизации раны. В целом гистологическая картина мало отличалась от той, что наблюдалась у молодых здоровых животных. Прием SkQ1 не вызывал нормализации уровня глюкозы и других признаков диабета, но существенно снижал уровень окислительного стресса повышенный у мышей db/db. Уровень окислительного стресса так же снижался у старых мышей. Дальнейшие исследования были направлены на расшифровку клеточных и молекулярных механизмов действия митохондриально-направленных антиоксидантов, определяющих их терапевтическое действие. В культуре подкожных фибробластов человека in vitro было показано, что SkQ1 стимулирует дифференцировку этих клеток и образование миофибробластов, а так же ускоряет движение монослоя фибробластов в «рану». Индивидуальная подвижность клеток при этом не менялась, но повышалась их упорядоченность и направленность движения в монослое. Наиболее ярко действие SkQ1 проявлялось в условиях гипергликемии, когда скорость движения клеток падает. Эти эффекты были связаны с активацией цитокина TGFb и Rho-зависимых сигнальных путей. По-видимому, они лежит в основе стимулирующего действия SkQ1 на формирование соединительной ткани при заживлении ран. SkQ1 ускорял так же движение монослоя кератиноцитов in vitro, что, может определять ускорение эпителизации раны. Избыточная нейтрофильная инфильтрация раны у старых и диабетических мышей, по-видимому, связана с нарушением проницаемости сосудов. В клетках эндотелия in vitro SkQ1 предотвращал перестройку цитоскелета и разборку межклеточных контактов, вызванную гипергликемией и воспалительным цитокином фактором некроза опухолей (ФНО). SkQ1 подавлял так же ФНО-зависимую экспрессию молекул адгезии ICAM1 и сорбцию нейтрофилов на поверхности эндотелия. Кроме того, SkQ1 предотвращал апоптоз клеток эндотелия вызванный высокими дозами ФНО. Защита от апоптоза была связана с предотвращением окислительного повреждения митохондрий, а так же с повышением содержания антиапоптозного белка Bcl-2. Защитное действие SkQ1 на клетки эндотелия лежит в основе его противовоспалительного действия и способствует заживления ран, как в модели диабета 2ого типа (мыши db/db), так и у старых мышей. Полученные данные доказывают, что избыточная продукция активных форм кислорода (АФК) в митохондриях определяет повреждение сосудов, хроническое воспаление и образование незаживающих ран при диабете и при старении. В рамках проекта ведется разработка раневых покрытий включающих SkQ1. Получены пленочные покрытия на основе хитозана и поливинилового спирта (ПВС), альгината и ПВС, а так же альгинатное гидрогелевое покрытие. Предварительные результаты свидетельствуют о положительном эффекте SkQ1 в составе этих покрытий.
химический факультет МГУ имени М.В. Ломоносова | Соисполнитель |
грант РФФИ |
# | Сроки | Название |
1 | 10 января 2011 г.-9 января 2012 г. | Роль митохондриальных активных форм кислорода в нарушениях процессов регенерации; разработка подходов к терапии труднозаживающих ран с применением митохондриально-направленных антиоксидантов |
Результаты этапа: На первом этапе мы исследовали действие митохондриально-направленного антиоксиданта SkQ1 на процесс заживления кожных полнослойных резаных ран у мышей линии C57BLKS-Leprdb/J (db/db) с наследственным ожирением и диабетом 2ого типа, а так же у старых (24 месяца) мышей линии CBAxC57bl/6. В обеих моделях длительный прием SkQ1 в дозе 250 нмоль/кг веса в сут. вызывал достоверное ускорение заживления ран. На ранних стадиях ранозаживления в области раны у мышей db/db и у старых мышей было выявлено значительное усиление нейтрофильной инфильтрации в области раны. Прием SkQ1 в обеих моделях вызывал снижение этого показателя до уровня, характерного для молодых здоровых животных. Одновременно под действием SkQ1 в ране значительно повышалось содержание макрофагов, сниженное у диабетических и старых мышей. Гистологический анализ показал, что в обеих моделях приём SkQ1 вызывал практически 3-х кратное увеличение толщины грануляционной ткани, накопление в ней миофибробластов, образование зрелых, регулярно ориентированных пучков коллагеновых волокон и значительное повышение объемной плотности сосудов. SkQ1 вызывал так же ускорение эпителизации раны. В целом гистологическая картина мало отличалась от той, что наблюдалась у молодых здоровых животных. Прием SkQ1 не вызывал нормализации уровня глюкозы и других признаков диабета, но существенно снижал уровень окислительного стресса повышенный у мышей db/db. Уровень окислительного стресса так же снижался у старых мышей. Дальнейшие исследования были направлены на расшифровку клеточных и молекулярных механизмов действия митохондриально-направленных антиоксидантов, определяющих их терапевтическое действие. В культуре подкожных фибробластов человека in vitro было показано, что SkQ1 стимулирует дифференцировку этих клеток и образование миофибробластов, а так же ускоряет движение монослоя фибробластов в «рану». Индивидуальная подвижность клеток при этом не менялась, но повышалась их упорядоченность и направленность движения в монослое. Наиболее ярко действие SkQ1 проявлялось в условиях гипергликемии, когда скорость движения клеток падает. Эти эффекты были связаны с активацией цитокина TGFb и Rho-зависимых сигнальных путей. По-видимому, они лежит в основе стимулирующего действия SkQ1 на формирование соединительной ткани при заживлении ран. SkQ1 ускорял так же движение монослоя кератиноцитов in vitro, что, может определять ускорение эпителизации раны. Избыточная нейтрофильная инфильтрация раны у старых и диабетических мышей, по-видимому, связана с нарушением проницаемости сосудов. В клетках эндотелия in vitro SkQ1 предотвращал перестройку цитоскелета и разборку межклеточных контактов, вызванную гипергликемией и воспалительным цитокином фактором некроза опухолей (ФНО). SkQ1 подавлял так же ФНО-зависимую экспрессию молекул адгезии ICAM1 и сорбцию нейтрофилов на поверхности эндотелия. Кроме того, SkQ1 предотвращал апоптоз клеток эндотелия вызванный высокими дозами ФНО. Защита от апоптоза была связана с предотвращением окислительного повреждения митохондрий, а так же с повышением содержания антиапоптозного белка Bcl-2. Защитное действие SkQ1 на клетки эндотелия лежит в основе его противовоспалительного действия и способствует заживления ран, как в модели диабета 2ого типа (мыши db/db), так и у старых мышей. Полученные данные доказывают, что избыточная продукция активных форм кислорода (АФК) в митохондриях определяет повреждение сосудов, хроническое воспаление и образование незаживающих ран при диабете и при старении. В рамках проекта ведется разработка раневых покрытий включающих SkQ1. Получены пленочные покрытия на основе хитозана и поливинилового спирта (ПВС), альгината и ПВС, а так же альгинатное гидрогелевое покрытие. Предварительные результаты свидетельствуют о положительном эффекте SkQ1 в составе этих покрытий. | ||
2 | 10 января 2012 г.-10 января 2013 г. | Роль митохондриальных активных форм кислорода в нарушениях процессов регенерации; разработка подходов к терапии труднозаживающих ран с применением митохондриально-направленных антиоксидантов |
Результаты этапа: |
Для прикрепления результата сначала выберете тип результата (статьи, книги, ...). После чего введите несколько символов в поле поиска прикрепляемого результата, затем выберете один из предложенных и нажмите кнопку "Добавить".