|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ФНКЦ РР |
||
Исследование конформации гемопорфирина в мутантных вариантах цитохрома Стезисы доклада
- Авторы: Островерхова Т.В., Браже Н.А., Браже А.Р., Черткова Р.В., Некрасов А.Н., Юсипович А.И., Долгих Д.А., Кирпичников М.П., Максимов Г.В.
- Сборник: IV Съезд биофизиков России. Симпозиум IV «Новые тенденции и методы в биофизике». Материалы докладов
- Том: 1
- Тезисы
- Год издания: 2012
- Место издания: типография Нижегородского государственного университета им. Н.И. Лобачевского Нижний Новгород
- Первая страница: 228
- Последняя страница: 228
- Аннотация: Цитохром С является nредставителем семейства гемсодержащих белков и осуществляет перенос электрона от комплекса III к комnлексу IV в дыхательной цепи митохондрий. Ранее нами было проведено компьютерное моделирование участка, включающего (76-83) аминокислотные остатки цитохрома C, и предложены мутантные варианты 181Y/ A83Y/G84N, Т78N/K79Y/M801/181M/F82N и Т78S/К79Р. Было показано, что полученные белки обладают существенно более сниженной электрон-транспортной активностью по сравнению с цитохромом С дикого типа. В настоящей работе исследовали конформацию гемоnорфирина в указанных восстановленных и окисленных мутантных вариантах цитохрома С методами традиционной спектроскопии комбинационного рассеяния (КР) и спектроскопии гигантского комбинационного рассеяния (ГКР), соответственно. Выявленные изменения в спектрах восстановленных мутантов 181Y/A83Y/G84N и Т78N/К79У/М801/181M/F82N и окисленных мутантов Т78N/К79У/М801/181M/F82N и Т78S/К79Р свидетельствуют об изменении характера колебаний и длины метиновых мостиков между пиррольными кольцами nорфирина,что указывает на более близкое расположение атома железа к плоскости nорфирина в мутантных вариантах цитохрома С no сравнению с диким типом. Было показано, что у всех восстановленных мутантных цитохромов затруднены колебания боковых метильных гpyпп пирролов и метиновых мостиков. Также было показано, что у окисленного мутанта Т78S/К79Р затруднены ассимметричные и симметричные колебания полуколец пирролов и боковых метильных гpyпп по сравнению с цитохромом С дикого типа. Таким образом, нами впервые было выявлено уменьшение подвижности гемопорфиринов в мутантных вариантах no сравнению с цитохромом С дикого типа. Обнаруженные изменения вызваны присутствием в рекомбинантных белках более жёсткого микроокружения гема. Полученные результаты хорошо согласуются с данными компьютерного моделирования и тестирования биологической активности цитохромов. Суммируя, изучаемый участок (76-83) а.о. несёт существенную функциональную нагрузку в nерестройках микроокружения гема и последующего транспорта электрона между цитохромом С и его партнерами в дыхательной цепи митохондрий.
- Добавил в систему: Юсипович Александр Иванович