Аннотация:Целью работы являлось создание флуоресцентных индикаторных систем для определения широкого круга катехоламинов и их метаболитов, флавоноидов на основе реакции их ферментативной дериватизации ароматическими аминами в биологических жидкостях и фармацевтических объектах. Для значительного повышения экспрессности анализа выяснение условий проведения индикаторных реакций и разработку соответствующих методик осуществляли в 96-луночных полистирольных планшетах с использованием спектрофлуориметра Cary Eclipse фирмы Agilent c планшетной приставкой.
В результате исследования установили, что с применением нативной пероксидазы и дифенилэтилендиамина (ДЭД) возможно определение 0.1 – 5.0, 0.025 – 0.5, 0.75 – 7.5 мкМ допамина, норадреналина, метил-L-ДОПА соответственно; а в присутствии бензиламина можно определить 0.005 – 0.01 и 0.75 – 7.5 мкМ адреналина и гомованилиновой кислоты соответственно, а также 0.025 – 5 мкМ ванилилминдальной кислоты по ее собственной флуоресценции без дериватизации. Разработаны флуоресцентные экспресс-методики определения флавоноидов: кверцетина, дигидрокверцетина, эпикатехина и кофейной кислоты с ДЭД в водно-органических и мицеллярных средах в диапазонах концентраций 0.1 – 5, 0.1 – 5, 0.1 – 5 и 0.1 – 10 мкМ, соответственно. Время анализа не превышает 30 мин. Предложенный подход к определению указанных соединений позволяет анализировать биологические жидкости практически без предварительной пробоподготовки и отделения матрицы образцов, а также оценивать качество растительного сырья и фармацевтических объектов, анализируя одновременно до 20 проб.