Транскрипционный фактор HIF1 негативно регулирует содержание глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы в клетках HEK293Tстатья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Информация о цитировании статьи получена из
Scopus
Статья опубликована в журнале из перечня ВАК
Статья опубликована в журнале из списка Web of Science и/или Scopus
Дата последнего поиска статьи во внешних источниках: 6 октября 2021 г.
Аннотация:Выявление новых мишеней регуляции индуцируемого гипоксией транскрипционного фактора HIF1 яв-ляется актуальной задачей клеточной и молекулярной биологии. С использованием индуктора накопле-ния HIF1 хлорида кобальта (CoCl2) и блокатора его трансляции топотекана проверяли ранее описанныйна мозге крысы феномен супрессии ключевого фермента пентозофосфатного пути глюкозо-6-фосфатде-гидрогеназы (Г6ФДГ) транскрипционным фактором HIF1. На первичной культуре фибробластов кожикрысы были определены нетоксические дозы CoCl2 (50 и 100 мкМ) и топотекана (0.2 и 1 мкМ). На линииклеток эмбриональной почки человека HEK293T (Human Embryonic Kidney 293T) исследовали взаимо-связь между накоплением HIF1α и содержанием Г6ФДГ методами вестерн блоттинг и дот-иммунофер-ментного анализа. Для проверки взаимосвязи между зависящим от дозы CoCl2 и топотекана изменениемсодержания HIF1α и HIF1-зависимой экспрессии клетки HEK293T трансфицировали вектором, содер-жащим ген люциферазы под контролем HIF1-зависимого промотора (HRE), и определяли её активностьхемилюминесцентным методом. Было установлено, что CoCl2 дозозависимо повышает содержание HIF1αи увеличивает люциферазную активность, способствуя уменьшению количества Г6ФДГ. Топотекан, напро-тив, снижает накопление HIF1α, что сопровождается уменьшением активности люциферазы и нормализаци-ей содержания Г6ФДГ. Результаты подтверждают наличие супрессирующего действия транскрипционногофактора HIF1 на содержание первого фермента пентозофосфатного пути в клетках человека.