Аннотация: Ранее уже публиковались данные о продолжающемся с ноября 2002 эксперименте по выживанию культуры трансформированных клеток китайского хомячка во флаконах Карреля без пересева [1,2]. В настоящее время эта культура живет при таких условиях уже более 13 лет, что является веским аргументом для учета этих результатов в разработке методов омоложения органов и тканей стареющего организма и увеличения продолжительности жизни человека. Также предлагается усовершенствование методики омоложения органов и тканей организма, которая описывалась в предыдущих работах [1,2,3].
МЕТОДЫ И РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Использовали спонтанно трансформированные клетки китайского хомячка (ТККХ) полученные из подкожной соединительной ткани, линия B11dii - FAF28, клон 431. Культуры клеток растили в стеклянных флаконах Карреля диаметром 54 мм, закрытых герметично резиновыми пробками (Рис. 1А) при температуре 370С. Использовали среду Игла с 10% сыворотки крупного рогатого скота. ТККХ не пересевали, но один раз в 3-4 сут, а позже один раз в 15 дней меняли среду на свежую. В течение всего эксперимента с 2.11.2002 г., который продолжается и в настоящее время, считали число живых клеток в каждом флаконе.
На рис. 3 показано изменение числа живых клеток в культуре ТККХ при замене ростовой среды, но без смены флаконов. Видно, что клетки в культуре остаются живыми в течение более 13 лет и 6 мес. (более 5000 сут). Старые клетки гибнут, открепляются от ростовой поверхности и переходят в ростовую среду. В разрушенном виде они присутствуют в ростовой среде (Рис. 2В). Тем самым они освобождают место для других клеток. Если в этот момент вылить старую среду, вместе с ней удаляются также старые и разрушенные клетки, а после добавления свежей среды, оставшиеся во флаконе живые («молодые» или «взрослые») клетки (одиночные клетки на рис. 2В), начинают вновь делиться и снова достигают насыщающей плотности. Далее процесс повторяется.
В пластмассовом флаконе (Рис. 1Б) культура не может жить неограниченно, т.к. старые клетки гибнут, но не открепляются от ростовой поверхности и не освобождают место для молодых, способных к делению клеток, которые из-за этого не могут делиться и вся культура погибает, несмотря на обновление среды.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Эксперименты являются основой для разработки нового метода омоложения организма человека. Ранее нами была обоснована возможность проводить параллели продолжительности жизни (ПЖ) культур клеток с данными по ПЖ животных и человека [4]. Мы предполагаем, что для обеспечения неограниченного по времени существования в молодом состоянии отдельных органов и всего организма требуется следующее: 1) выделение жизнеспособных клеток из органа или ткани и культивирование в искусственных условиях; 2) введение в эти клетки гена теламеразы; 3) размножение клеток; 4) устранение из старого органа его части – старых тканей и клеток; 5) ввод в оставшуюся часть органа, прилегающую к удаленной, размноженные клетки с геном теломеразы. Клетки начнут размножаться, заполнять место удаленной части и орган восстановится [3]. После нескольких циклов п.1-5 не будет необходимости в выполнении пунктов1-3 и 5, а достаточно выполнять п.4, т.е. удалять часть старого органа, прилегающего к восстановленной части органа и клетки с геном теломеразы начнут размножаться и заполнять удаленную часть. Это возможно благодаря свойству теломеризованых клеток - неограниченное число делений [5,6].