Аннотация:Helminthosporium solani Durieu & Montagne — почвенный гриб, способный как к сапротрофному, так и к паразитическому образу жизни. Он является возбудителем «серебристой парши» — одного из самых распространенных заболеваний картофеля. Серебристая парша значительно снижает эстетичность клубней, особенно заметны поражения на клубнях красных сортов картофеля. Для борьбы с H. solani применяются фунгицидные препараты, самым популярным из которых является тиабендазол. Он входит в состав пирогенных (поджигаемых) шашек, которыми удобно обрабатывать клубни в хранилище. При длительном использовании препаратов с тиабендазолом появляются устойчивые штаммы H. solani. Присутствие в популяциях устойчивых штаммов приводит к резкому снижению эффективности применения тиабендазола. В работе исследовали естественно зараженные образцы клубней картофеля из Дальневосточной (Магаданской области и Приморского края) и Европейской части России (Московской, Костромской, Калужской, Владимирской, Брянской, Костромской областей, Чувашской республики), собранные в 2013–2018 годах на коммерческих картофельных полях. Всего было проанализировано 37 штаммов. Выделение штаммов H. solani в чистые культуры, экстракцию ДНК, проведение ПЦР, экстракцию ампликонов из геля, секвенирование, выполняли как описано в [1]. Оценку устойчивости к тиабендазолу проводили на питательной среде, содержащей фунгицид в разных концентрациях. Оценивали рост штаммов на среде с фунгицидом относительно бесфунгицидного контроля. Для каждого штамма оценивали показатель ЕС50, т. е. концентрацию тиабендазола в среде, которая приводила к замедлению радиального прироста колонии 2 раза относительно контроля. Мутации в гене бета-тубулина не были обнаружены у 30 протестированных штаммов из европейских и дальневосточных регионов России. Все эти штаммы были чувствительны к тиабендазолу (ЕС50< 8,5 мг/л). Последовательности их генов бета-тубулина были одинаковыми и соответствовали последовательности GenBank Y10670 для штаммов, чувствительных к тиабендазолу [2]. Мутации в изучаемом гене были обнаружены у 7 штаммов. Эти штаммы различались по устойчивости к тиабендазолу. Штамм из Московской области H14MCh2 с мутацией в кодоне 200 (замена Phe (TTC) на Tyr (TAC)) и штаммы H14MCh24 (Московская обл.), H15KSu10 (Костромская обл.), H18KNp2–1/1 (Калужская обл.) с мутацией в кодоне 198 (замена Glu (GAG) на Gln (CAG)), были высокоустойчивы к тиабендазолу (ЕС50> 1000 мг/л). Устойчивость к тиабендазолу штаммов, обладающих этими мутациями, была отмечена и другими исследователями [2,3]. Два штамма из Магаданской области (H17MaS 7/5 и H17MaS 11/2) имели мутацию гена бета-тубулина в кодоне 305. Эта ранее не известная однонуклеотидная мутация не вызывала замещения аминокислот и не повышала устойчивость к фунгициду. Таким образом, устойчивые к тиабендазолу штаммы с мутациями в гене бета-тубулина были обнаружены только в Европейской части России. Штаммы, выделенные из клубней картофеля, выращенных на Дальнем Востоке, были чувствительны к тиабендазолу.Работа выполнена при поддержке Российского Фонда Фундаментальных Исследований (грант20–016–00139).Список литературы1. Kutuzova IA., Kokaeva LY., Pobendinskaya MA, Krutyakov YA, Skolotneva ES, Chudinova EM, ElanskySN (2017) Resistance of Helminthosporium solani strains to selected fungicides applied for tuber treatment. J Plant Pathol 99(3):635–642.2. McKay GJ, Cooke LR (1997) A PCR-based method to characterize and identify benzimidazole resistance in Helminthosporium solani. FEMS Microbiol Lett 152:371–378.3. Koenraadt H, Somerville SC, Jones AL (1992) Characterization of mutations in the beta-tubulin gene of benomyl-resistant field strains of Venturia inaequalis and other plant pathogenic fungi. Phytopathology 82:1348–1354.
