|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ФНКЦ РР |
||
КИНЕТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ВЕНТУРИЦИДИНА С Fo∙F1-АТРАЗОЙ/СИНТАЗОЙ ПРОЧНОСОПРЯЖЕННЫХ СУББАКТЕРИАЛЬНЫХ ФРАГМЕНТОВ PARACOCCUS DENITRIFICANSстатья Тезисы
- Авторы: Жарова Т.В., Козловский В.С.
- Сборник: III ОБЪЕДИНЕННЫЙ НАУЧНЫЙ ФОРУМ ФИЗИОЛОГОВ, БИОХИМИКОВ И МОЛЕКУЛЯРНЫХ БИОЛОГОВ; VII СЪЕЗД БИОХИМИКОВ РОССИИ; X РОССИЙСКИЙ СИМПОЗИУМ «БЕЛКИ И ПЕПТИДЫ»; VII СЪЕЗД ФИЗИОЛОГОВ СНГ. НАУЧНЫЕ ТРУДЫ
- Том: 2
- Год издания: 2021
- Место издания: Перо Москва
- Первая страница: 65
- Последняя страница: 65
- Аннотация: Широко признано, что Fo∙F1-АТРазы/синтазы действуют как обратимые хемо-электромеханические молекулярные машины, при этом предполагается, что гидролиз АТР, генерирующий протон-движущую силу, pmf, и синтез АТР, потребляющий pmf, протекают по одним и тем же механизмам. Однако многочисленные экспериментальные данные, полученные в нашей лаборатории, позволили сформулировать новую гипотезу, согласно которой механизмы реакций синтеза и гидролиза АТР различаются и катализируются разными формами комплекса Fo∙F1 [1]. Ранее мы показали, что вентурицидин, специфический ингибитор окислительного фосфорилирования, блокирует фермент со значительной разницей в аффинности, зависящей от направления катализа [2]. В настоящей работе мы детально исследовали кинетику торможения вентурицидином Fo∙F1-АТРазы/синтазы в составе высокосопряженных мембран Paracoccus denitrificans в реакции синтеза и гидролиза АТР. Реакцию гидролиза АТР мы регистрировали по АТР-зависимому восстановлению NAD+ (pmf-зависимый обратный перенос электронов). Примененный нами подход позволил измерять прямую и обратную реакции, катализируемые Fo∙F1, в условиях энергизованной мембраны. Остаточная активность в реакции синтеза АТР линейно падала при повышении концентрации ингибитора, тогда как при гидролизе АТР эта зависимость была сигмоидальной: в области низких концентраций ингибитора значительное торможение синтеза АТР вентурицидином не сопровождалось падением скорости гидролиза. Кажущееся значение I50 (выраженное в молях ингибитора на моль фермента) для обеих реакций не зависело от концентрации фермента и различалось в 2,5 раз. Такое поведение объясняется моделью, включающей две разные форм Fo∙F1, одна из которых катализирует синтез, а вторая – гидролиз АТР. Обе формы характеризуются разным сродством к вентурицидину и взаимодействуют с ингибитором в гидрофобной фазе.1. Виноградов А.Д. (2019) Биохимия, 84, 1553-1563.2. Zharova T.V., Vinogradov A.D. (2017) Biochim. Biophys. Acta, 1858, 939-944
- Добавил в систему: Жарова Татьяна Вадимовна