|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ФНКЦ РР |
||
Молекулярно-биологическая и биохимическая характеристика внеклеточных протеаз термофильных бактериальных штаммовстатья
- Авторы: Романова М.В., Кузнецов А.Е., Белодед А.В.
- Журнал: Бутлеровские сообщения
- Том: 68
- Номер: 12
- Год издания: 2021
- Издательство: Бутлер. наследие
- Местоположение издательства: Казань
- Первая страница: 103
- Последняя страница: 111
- DOI: 10.37952/ROI-jbc-01/21-68-12-103
- Аннотация: Использование индивидуальных и комплексных ферментных препаратов, в том числе протеолитического действия, является одной из важнейших составляющих промышленных технологий, молекулярно-биологических исследований, медицинской диагностики и терапии. В качестве источников ферментов особое внимание привлекают микроорганизмы, поскольку они отличаются большим разнообразием, простой культивирования и восприимчивостью к генетическим модификациям по сравнению с источниками растительного и животного происхождения. Ферменты, выделенные из термофильных бактерий, характеризуются подходящим набором технологических свойств, таких как термостабильность, устойчивость к действию химических агентов и экстремальных значений pH. Например, бациллярные протеазы обладают высокой эффективностью и широкой субстратной специфичностью и успешно используются в производстве моющих средств, фармацевтической, пищевой и кормовой промышленности. В данной работе было проведено исследование профиля секретируемых протеаз штаммов термофильных бактерий, а также поиск у штаммов генов, ответственных за синтез внеклеточных протеолитических ферментов. Было установлено, что термофильные штаммы Кб.1.Гл.8, Кб.12.С.33 и Кб.12.Гл.35, предварительно идентифицированные как бактерии рода Bacillus, секретируют широкий спектр протеаз с массами от 15 до 63 кДа, среди которых обнаружены ферменты, способные с разной эффективностью гидролизовать желатин, казеин и гемоглобин. В ходе ингибиторного анализа у изучаемых штаммов были выявлены сериновые протеазы диапазона масс 33.5-57.0 кДа и металлопротеаза массой 28,2 кДа. При помощи ПЦР в реальном времени был проведен генетический скрининг термофильных штаммов Кб.1.Гл.8, Кб.12.С.33 и Кб.12.Гл.35 на наличие генов, кодирующих внеклеточные протеолитические ферменты, в результате которого у культур были обнаружены гены bpr, aprE, mpr и nprB, определяющие продукцию бациллопептидазы F, субтилизина E, глутамилспецифичной эндопептидазы и нейтральной цинкзависимой протеазы, которые широко распространены у бактерий Bacillus subtilis и родственных видов.
- Добавил в систему: Романова Мария Васильевна