Разработка основ технологии получения рекомбинантного катепсина L Tribolium castaneum в дрожжах Komagataella kurtzmanii

Серкина, А.В.; Губайдуллин, И.И.; Акентьев, Ф.И.; Домбровский, И.А.; Филиппова, И.Ю.; Элпидина, Е.Н.; Козлов, Д.Г.; Булушова, Н.В.

Авторы: Серкина А.В., Губайдуллин И.И., Акентьев Ф.И., Домбровский И.А., Филиппова И.Ю., Элпидина Е.Н., Козлов Д.Г., Булушова Н.В.
Журнал: Биотехнология
Том: 38
Номер: 3
Год издания: 2022
Издательство: ГосНИИгенетика
Местоположение издательства: М.
Первая страница: 22
Последняя страница: 34
DOI: 10.56304/S0234275822030085
Аннотация: На базе метилотрофных дрожжей Komagataella kurtzmanii получен штамм-продуцент рекомбинантного прокатепсина L Tribolium castaneum (rpTcCathL), обеспечивший биосинтез и секрецию не менее 0,5 г/л целевого белка в условиях культивирования в колбах на среде комплексного состава. Определено, что рН среды культивирования дрожжей (рН ≥ 6.5) является ключевым фактором, влияющим на биосинтез и накопление прокатепсина. Разработана новая схема хроматографической очистки, позволяющая получать рекомбинантный прокатепсин с выходом около 30% и чистотой свыше 95%. Показано, что полная автокаталитическая активация профермента достигается при температуре 37°С, рН 4.0–4.5 в течение не более 30 мин. При этом в концентрации 0.5 мг/мл и ниже препараты рекомбинантного прокатепсина и активированного катепсина могут сохраняться без детектируемых изменений при температуре +4°С в течение, минимум, двух недель. Таким образом, в результате проведенных исследований были разработаны основы технологии получения и хранения рекомбинантных препаратов высокоочищенного главного пищеварительного катепсина L T. castaneum в форме профермента и зрелого катепсина L.
Добавил в систему: Элпидина Елена Николаевна

	ИСТИНА	Войти в систему Регистрация
	ФНКЦ РР
	Главная Поиск Статистика О проекте Помощь

ИСТИНА

ФНКЦ РР

Разработка основ технологии получения рекомбинантного катепсина L Tribolium castaneum в дрожжах Komagataella kurtzmaniiстатья

Прикрепленные файлы