|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ФНКЦ РР |
||
Замена βQ263L ослабляет АДФ-ингибирование АТФазной активности АТФ-синтазы дрожжей и повышает скорость роста клеток без мтДНКтезисы доклада
- Авторы: Лапашина А.С., Кашко Н.Д., Зубарева В.М., Галкина К.В., Маркова О.В., Кнорре Д.А., Фенюк Б.А.
- Сборник: III Объединенный научный форум физиологов, биохимиков и молекулярных биологов. VII съезд биохимиков России. X Российский симпозиум "Белки и пептиды". VII съезд физиологов СНГ. Сочи, Дагомыс, 3–8 октября 2021. Научные труды
- Том: 2
- Тезисы
- Год издания: 2021
- Издательство: Общество с ограниченной ответственностью Издательство Перо
- Местоположение издательства: Москва
- Первая страница: 78
- Последняя страница: 78
- Аннотация: Митохондриальная АТФ-синтаза (FOF1) катализирует синтез АТФ из АДФ и неорганического фосфата за счет протондвижущей силы (pmf) на внутренней мембране митохондрий. При снижении pmf фермент может генерировать ее самостоятельно, работая в обратном направлении и гидролизуя АТФ. АТФазная активность АТФ-синтазы тонко регулируется: она может, с одной стороны, истощить запасы АТФ в клетке, с другой – требоваться для поддержания pmf на мембране митохондрий при инактивации дыхательной цепи (например, при гипоксии). Для всех FOF1 описано неконкурентное ингибирование АТФазной активности комплексом MgАДФ (АДФ-ингибирование). Ранее мы показали, что у бактерий выраженность и свойства АДФ-ингибирования в заметной степени определяются единичным аминокислотным остатком субъединицы β. Замена лейцина на глутамин в позиции β249 в АТФ-синтазе E. coli значительно усиливала АДФ-ингибирование, а обратная замена в той же позиции (βQ259L) у Bacillus subtilis, напротив, приводила к его ослаблению. У митохондриальных ферментов (в т.ч. у дрожжей Saccharomyces cerevisiae), как и у B. subtilis, в этой позиции (β263) находится остаток глутамина. В настоящей работе был получен штамм S. cerevisiae с заменой βQ263L. Сравнение АТФазных активностей пермеабилизованных аламетицином митохондрий и субмитохондриальных частиц, полученных из родительского и мутантного штаммов дрожжей, показало, что замена βQ263L снизила чувствительность АТФ-синтазы к АДФ, азиду (ингибитору, блокирующему фермент в состоянии АДФ-ингибирования) и LDAO – веществу, которое, напротив, препятствует АДФ-ингибированию и стимулирует гидролиз АТФ. Это позволяет заключить, что замена βQ263L ослабила АДФ-ингибирование. Скорость роста клеток дрожжей с заменой βQ263L в сравнении с родительским штаммом оказалась снижена. Однако удаление мтДНК (мутация rho0) из обоих штаммов изменило картину: скорость роста штамма βQ263L rho0 была выше, чем скорость роста контрольного rho0 штамма. Мы предполагаем, что замена βQ263L, ослабляющая АДФ-ингибирование АТФазной активности АТФ-синтазы, оказывается выгодной для клеток без мтДНК, которым, вероятно, высокая скорость гидролиза АТФ в матриксе митохондрий нужна для поддержания pmf на мембране за счет АТФ/АДФ-антипортера. Работа выполнена при поддержке Российского научного фонда (грант 20-14-00268).
- Добавил в систему: Лапашина Анна Сергеевна