Тканеинженерная конструкция для восстановления поврежденного желчного протока

Дюжева, Т.Г.; Люндуп, А.В.; Клабуков, И.Д.; Крашенинников, М.Е.; Тенчурин, Т.Х.; Шепелев, А.Д.; Балясин, М.В.; Демченко, А.Г.; Титов, А.С.; Чвалун, С.Н.

Авторы: Дюжева Т.Г., Люндуп А.В., Клабуков И.Д., Крашенинников М.Е., Тенчурин Т.Х., Шепелев А.Д., Балясин М.В., Демченко А.Г., Титов А.С., Чвалун С.Н.
Журнал: Альманах Института хирургии им. А.В. Вишневского
Номер: 1
Год издания: 2017
Первая страница: 842
Последняя страница: 843
Аннотация: Актуальность. Интраоперационные травмы желчного протока при холецистэктомии являются серьезным осложнением со стабильно высокой частотой: от 0,05 до 0,2% при открытой операции и до 2,7% - при лапароскопической холецистэктомии. Реконструктивные операции (гепатикоеюностомия) остаются основным методом лечения при пересечении и иссечении желчного протока. Многочисленные предложения по восстановлению его проходимости с помощью естественных трансплантатов или пластиковых/металлических стентов не позволяют добиться долгосрочного положительного результата. Однако современные технологии регенеративной медицины позволяют на новом уровне рассмотреть возможность выполнения восстановительных операций. Цель. Разработка трубчатой тканеинженерной конструкции из биосовместимых и биоразлагаемых материалов с клеточным покрытием для восстановления поврежденного желчного протока. Материал и методы. Из сополимеров молочной и гликолевой кислот с поликапролактоном методом электроформования изготовлены несколько вариантов биосовместимого биоразлагаемого материала и созданы трубчатые каркасы конструкции. Все образцы были охарактеризованы, изучены их структура, физико-механические свойства, определены их краевые углы смачивания. Проведена модификация (функционализация) материала конструкции с использованием ростового фактора EGF и препарата «Неоваскулген». При изучении образцов использовалась оптическая, атомно-силовая и сканирующая электронная микроскопии. Для скрининга биологических свойств матриксов использовали клеточные линии MCF-7 (эпителиальная линия опухолевых клеток человека с характеристиками дифференцированного эпителия) и 3T3/NIH (линия фибробластов мыши) и МТТ-тест. Конструкции получали путем заселения каркасов эпителиоцитами желчных протоков и мезенхимальными стромальными клетками костного мозга с контролем жизнеспособности при конфокальной микроскопии. Проведены исследования механических свойств каркасов, конструкций и нативных тканей. Исследованы биологические свойства модифицированных матриксов методом биосенсорного клеточного анализа in vitro (прибор iCelligence, Acea Biotechnology). Проведена морфометрия количества сосудов в образцах материала, имплантированного в модельных животных. Результаты. Разработаны требования и технологические режимы для изготовления плоских образцов и трубчатых многослойных каркасов желчных протоков из биосовместимых биоразлагаемых нетканых материалов. Исследование механических характеристик подтвердило прочность сформованных каркасов и конструкций на уровне нативного желчного протока. Определены наиболее биологически пригодные полимеры и режимы получения функционализированного EGF и Неоваскулгеном материала. Выбранные материалы конструкции не были токсичными, жизнеспособность клеток в конструкции варьировала от 80% до 94%. Показано, что модифицированные матриксы обладают, за счет выхода биологически активных соединений, эффектом стимуляции пролиферации культур эпителиальных клеток in vitro (средний клеточный индекс – 465 против 160 при использовании нефункционализированного матрикса) и васкулогенеза in vivo. Заключение. Разработана технология и создана модель многослойной трубчатой тканеинженерной конструкции на основе композитного каркаса из сополимеров молочной кислоты с клеточным покрытием и функционализацией материала каркаса белковыми и ДНК-молекулами. Прочностные характеристики конструкции соответствуют нативному желчному протоку, биологические – способствуют пролиферации клеток и васкулогенезу, что позволяет продолжить ее изучение для восстановления желчного протока в доклинических исследованиях по разработанному протоколу. Работа выполнена при поддержке соглашения о субсидии №14.604.21.0133 Минобрнауки РФ (уникальный идентификатор RFMEFI60414X0133).
Добавил в систему: Клабуков Илья Дмитриевич

	ИСТИНА	Войти в систему Регистрация
	ФНКЦ РР
	Главная Поиск Статистика О проекте Помощь

ИСТИНА

ФНКЦ РР

Тканеинженерная конструкция для восстановления поврежденного желчного протокастатья Тезисы

Прикрепленные файлы