|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ФНКЦ РР |
||
ПРИМЕНЕНИЕ ГАЗОВОЙ ХРОМАТО-МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИ ДЛЯ УСКОРЕННОЙ ИДЕНТИФИКАЦИИ ГЕМОКУЛЬТУРстатья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Статья опубликована в журнале из перечня ВАК- Авторы: Попов Д.А., Овсеенко С.Т., Осилов Г.А.
- Журнал: Бюллетень НЦССХ им. А.Н. Бакулева РАМН. Сердечно-сосудистые заболевания
- Том: 10
- Номер: S6
- Год издания: 2010
- Издательство: Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр сердечно-сосудистой хирургии имени А.Н. Бакулева" Министерства здравоохранения Российской Федерации
- Местоположение издательства: Москва
- Первая страница: 227
- Аннотация: Цель: определить возможность ускоренной идентификации гемокультур по клеточным жирным кислотам (КЖК) микроорганизмов с применением метода газовой хромато-масс-спектрометрии (ГХ-МC) (зарегистрирован Росздравнадзором за № 2010/038 от 24.02.2010).Материалы и методы: инкубация гемокультур осуществлялась по стандартному протоколу во флаконах FA Aerobic Bottle с помощью прибора BACTAlert 3D (Biomerieux, Франция). При выявлении положительной гемокультуры проводили ее идентификацию и исследовали чувствительность к антибиотикам на автоматическом анализаторе Vitek 2 compact (Biomerieux, Франция). Параллельно с традиционными методами, содержимое 20 случайным образом взятых «проросших» флаконов исследовано методом ГХ-МС. Образец в объеме 4 мл центрифугировали, осадок, содержащий клетки микроорганизмов, высушивали и подвергали кислому метанолизу в 1,2N HCl в метаноле (1 час, 80оС). Далее реакционную смесь экстрагировали гексаном, экстракт высушивали, силилировали в 20 мкл реактива BSTFA. Анализ проводили на системе ГХ-МС 6890/5973 (Agilent Technologies, USA).Результаты: в 20 взятых в исследование гемокультурах традиционными методами выделены 5 видов микроорганизмов, в 2 случаях – в ассоциациях: A. baumannii (n=8), K. pneumoniae (n=5), S. epidermidis (n=4), S. haemolyticus (n=3), Candida parapsilosis (n=2). Те же микроорганизмы, но с идентификацией до рода, были детектированы по жирнокислотному спектру с помощью метода ГХ-МС. Интенсивность сигнала микробных маркеров в исследованных образцах (изо- и антеизо¬пентадекановой, изо- и анте-изогептадекановой, антеизононадекановой кислот (маркеры Staphylococcus), 3-гидрокси- и 2-гидроксидодекановой кислот (маркеры Acinetobacter), циклогепта-декановой и β-оксимиристиновой кислот (маркер Klebsiella) и гептадеценовой кислоты (маркер Candida)) в соответствующих образцах в десятки раз превышала уровень контроля – отрицательной гемокультуры. Показана возможность сокращения времени анализа родовой идентификации до трех часов против 1,5-2 суток при традиционном подходе.Выводы: полученные результаты свидетельствуют о том, что с помощью метода ГХ-МС имеется возможность существенного ускорения родовой идентификации микроорганизмов в положительной гемокультуре, что может явиться полезным для оптимизации эмпирического назначения антибиотиков. Вместе с тем, это нисколько не умаляет значения традиционной микробиологической диагностики, так как только она обеспечивает получение данных о чувствительности выделенных микроорганизмов к антимикробным препаратам.
- Добавил в систему: Овсеенко Светлана Тимофеевна