|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ФНКЦ РР |
||
ЖИЗНЕСПОСОБНОСТЬ КРОЛИЧЬИХ И МЫШИНЫХ ЭМБРИОНОВ ПОСЛЕ ВИТРИФИКАЦИИ В ОТКРЫТЫХ СВЕРХТОНКИХ ПЛАСТИКОВЫХ КАПИЛЛЯРАХстатья
- Авторы: Кириенко К.В., Максименко О.С., Трубицина Т.П., Максименко С.В., Рябых В.П.
- Журнал: Проблемы биологии продуктивных животных
- Номер: 3
- Год издания: 2014
- Первая страница: 51
- Последняя страница: 61
- Аннотация: Предложен усовершенствованный метод витрификации эмбрионов в открытых сверхтонких пластиковых капиллярах. Уравновешивание эмбрионов в среде витрификации осуществляли в два этапа: 1) в течение 2 мин в DPBS + 10% FCS + 7,5% этиленгликоль + 7,5% DMSO; 2) в течение 30-40 с в среде DPBS + 10% FCS + 16,5% этиленгликоль + 16,5% DMSO + 0,5 М сахароза; затем эмбрионы помещали в пластиковый капилляр и погружали в жидкий азот. Оттаивание и отмывание эмбрионов осуществляли в 3 этапа: 1) в течение 2,5 мин в DPBS + 10% FCS + 0,5 М сахароза; 2) в течение 2,5 мин в DPBS + 10% FCS + 0,25 М сахароза; 3) в течение 1 мин в DPBS + 10% FCS. При использовании этой схемы, витрификация эмбрионов мыши, находящихся на стадии 8-ми бластомеров и на стадии бластоцисты, не оказала отрицательного воздействия на их жизнеспособность. Витрификация одноклеточных и 4-клеточных эмбрионов снижала процент развившихся до стадии бластоцисты до 45,0 и 15,6% против 86,7 и 95,2% в контроле соответственно. Витрификация кроличьих эмбрионов на стадии бластоцист не оказала отрицательного воздействия на их жизнеспособность, в отличие от эмбрионов, находившихся на стадии 8-16 бластомеров; доля их, развившихся до стадии бластоцисты, была снижена до 62,5 против 100% в контроле соответственно. Предложенная схема витрификации позволяет без снижения жизнеспособности криоконсервировать мышиные эмбрионы на стадии 8-и бластомеров и бластоцисты, а кроличьи эмбрионы - на стадии бластоцисты.
- Добавил в систему: Кириенко Константин Владимирович