Каталитические свойства щелочных фосфатаз в различных условияхстатья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Статья опубликована в журнале из перечня ВАК
Статья опубликована в журнале из списка Web of Science и/или Scopus
Дата последнего поиска статьи во внешних источниках: 16 февраля 2016 г.
Аннотация:Проведено сравнительное исследование каталитических свойств щелочных фосфатаз из бактерий Escherichia coli и кишечников быка и цыпленка. Определены активности димеров и тетрамеров этих ферментов. Показано, что активности димеров в 3 – 4 раза выше активности тетрамеров; максимальной активностью и наибольшим сродством к 4-нитрофенилфосфату обладает бактериальная щелочная фосфатаза (Км = 1.7∙10-5М, Vmax = 1800 мкмоль/(мин×мг белка) - димеры и Vmax = 420 мкмоль/(мин×мг белка) - тетрамеры;). Константы Михаэлиса для двух животных фосфатаз в различных буферных средах (рН 8.5) одинаковы (3.5±0.2)∙10-4М). Выявлено, что из пяти буферных систем (трис, карбонатный, хепес, боратный, глициновый) наименьшую каталитическую активность при одинаковых рН щелочные фосфатазы проявляют в боратном буфере: для фермента из кишечника быка Vмакс = 80 мкмоль/(мин×мг белка). Установлено, что катионы Cu2+, образуя комплексное соединение с трис-(оксиметил)-аминометаном (буфер трис-HCl), ингибируют кишечные щелочные фосфатазы по бесконкурентному механизму.