ИСТИНА

Предложены подходы к чувствительному определению медленно окисляемых и ограниченно растворимых в воде субстратов (восстановителей и окислителей) растительных пероксидаз из корней хрена (ПХ) и шелухи сои (ПС) в водных и водно-органических растворах со спектрофотометрическим (СФ) и флуориметрическим (ФЛ) контролем скорости индикаторных реакций. Для повышения чувствительности определения КА получены их интенсивно флуоресцирующие производные в результате реакций их дериватизации с мезо-1,2-дифенолэтилендиамином или бензиламином в присутствии ПХ. Введение в реакцию ДМСО, прямых мицелл ПАВ цетилметиламмоний бромида и использование в качестве источника возбуждения флуоресценции лазерного излучения позволили улучшить метрологические характеристики разработанных методик определения КА, которые были применены в анализе фармацевтических препаратов. В результате изучения 5 ферментативных и 1 некаталитической индикаторных систем показано, что для определения природного эндопероксидного соединения артемизинина и синтетического эндопероксида 1,2,4,5-тетраоксана перспективны индикаторные системы: HCl – Н2О2 – I- и о-дианизидин  пероксидаза хрена  Н2О2 соответственно. Разработана кинетическая некаталитическая методика определения 0.15 – 1 мМ артемизинина и показана возможность ферментативного определения 0.2 – 0.6 мМ 1,2,4,5-тетраоксана. Для эффективной биоконверсии ограниченно растворимых в воде серосодержащих органических субстратов пероксидаз (на примере тиоанизола и дибензотиофена) обосновано использование биокатализатора гемоглобина; оптимизированы условия проведения процесса в среде вода-ацетонитрил. В результате СФ изучения кинетики катализируемых ПХ и ПС модельных реакций окисления гваякола и о-хлорфенола трет-бутилгидропероксидом в водно-органических средах в присутствии ДМСО, 1,4-диоксана, ДМФА, ацетонитрила и этанола, а также гидрофильных ИЖ  тетрафторборатов 1-бутил-3-метилимидазолия ([BMIm][BF4]) и N-бутил-4-метилпиридиния ([BMPy][BF4]) показано, что эффективность пероксидазного окисления фенольных соединений в присутствии ИЖ зависит от источника фермента, катиона ионной жидкости, природы буферного водного раствора как сорастворителя, а также природы субстрата-восстановителя. С использованием ПХ и ПС разработаны методики определения о-хлорфенола (сН 3–7 мкМ) и гваякола (сн 0,05–0,5 мМ) в средах вода-органический растворитель (ДМСО, ацетонитрил – 20-25%) и в присутствии 60-80 об.% [BMIm][BF4]. Методики применены для анализа ограниченно растворимого в воде стоматологического препарата