![]() |
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ФНКЦ РР |
||
Разработана методика введения тритиевой метки с помощью метода термической активации в лизоцим и альбумин, позволяющая получать меченые белки с удельной радиоактивностью 46 Ки/ммоль и 110 Ки/ммоль для лизоцима и альбумина соответственно. Меченые препараты охарактеризованы с помощью эксклюзионной хроматографии, УФ-спектроскопии, а также найдено распределение трития по аминокислотным остаткам белка. С помощью метода сцинтиллирующей фазы определено распределение между фазами и концентрирование на межфазной границе сывороточного альбумина человека в системах водный раствор/п-ксилол, водный раствор/октан и водный раствор/октанол. Величины коэффициентов распределения альбумина составили (3.2±0.6)×10^-3, (1.3±0.2)×10^-3, (3.1±0.5)×10^-3 для систем с п-ксилолом, октаном и октанолом соответственно. Найдено, что при низких концентрациях изотермы адсорбции альбумина на межфазной границе для всех трех систем были близки и имели Лэнгмюровский вид. При концентрации 0.02 мг/мл образовывался адсорбционный монослой белка, который для системы вода/октан далее мало менялся. Однако в других системах при концентрации альбумина выше 0.1 мг/мл наблюдался дальнейший рост адсорбции, которая достигала при концентрации 1 мг/мл от 3 (п-ксилол) от 5 (октанол) молекулярных слоев белка. Для системы водный раствор/п-ксилол исследовано взаимное влияние альбумина и ионогенных поверхностно-активных веществ (ПАВ) додецилсульфата натрия и бромида додецилтриметиламмония при конкурентной адсорбции на межфазной границе жидкость/жидкость при концентрации белка 0.05, 0.55 и 1 г/л. Оказалось, что в отличие от лизоцима, добавки ПАВ практически не влияют на адсорбцию альбумина на межфазной границе и на коэффициент распределения белка между фазами. При этом адсорбция ионогенных ПАВ снижалась в присутствии альбумина. Исследование адсорбции альбумина и ряда гуминовых веществ на графене в сравнении с адсорбцией на межфазной границе вода/п-ксилол позволило выдвинуть гипотезу о существенном влиянии молекул п-ксилола на образование адсорбционных слоев, вероятно, посредством образования устойчивых комплексов с молекулами альбумина.