ИСТИНА

Сурфактин – циклический гептапептид, этерифицированный жирной кислотой. Он является хорошо исследованным и востребованным биологическим поверхностно-активным веществом (биоПАВ). Преимущества сурфактина по сравнению с синтетическими ПАВ – биологическая совместимость, экологическая безопасность, низкая токсичность [1]. Микробиологический синтез сурфактина – единственный способ его промышленного получения, однако титр соединения у природных штаммов-продуцентов, одними из которых являются бактерии Bacillus subtilis, слишком мал. 6S РНК – это малая некодирующая РНК, играющая роль глобального регулятора транскрипции в бактериальных клетках. Клетки B. subtilis имеют две 6S РНК: 6S-1 и 6S-2. На основании предыдущих исследований мы сделали предположение, что малые некодирующие РНК участвуют в регуляции биосинтеза сурфактина в клетках B. subtilis. Объектами исследования в данной работе были клетки B. subtilis природного штамма NCIB 3610 и лабораторного штамма PY79. Ранее было показано, что лабораторный штамм PY79 не способен к биосинтезу сурфактина из-за мутации в гене sfp [2]. При делеции гена 6S-2 РНК уровень транскрипции гена srfAA оперона srfA для обоих штаммов B. subtilis практически не изменяется по сравнению с диким типом во всех фазах клеточного роста. Уровень биосинтеза сурфактина для клеток штамма NCIB 3610 также не изменяется по сравнению с клетками дикого типа. Таким образом, делеция гена 6S-2 РНК не приводит к изменению эффективности биосинтеза сурфактина. При двойной делеции генов 6S-1 и 6S-2 РНК уровень транскрипции гена srfAA оперона srfA в штамме NCIB 3610 B. subtilis также не меняется во всех фазах клеточного роста. Однако в клетках PY79 в поздней стационарной фазе (28 ч от начала роста) наблюдается значительное повышение уровня транскрипции гена srfAA (примерно в 3 раза). Аналогичный эффект показан и для остальных генов оперона srfA (srfAB, srfAC, srfAD) в данной фазе клеточного роста. В стационарной фазе роста клеток NCIB 3610 наблюдается значительное снижение уровня биосинтеза сурфактина, (примерно в 2 раза для образцов, отобранных через 12 ч и 24 ч от начала роста). Однако через 36 и более часов от начала роста количества продуцируемого сурфактина клетками дикого типа и с двойной делецией практически не отличаются между собой. Похожий эффект был показан для штамма NCIB 3610 с делецией гена 6S-1 РНК. В этом случае наблюдалось увеличение относительного количества мРНК оперона srfA в поздней стационарной фазе роста, однако количество продуцируемого сурфактина оставалось одинаковым. Таким образом, показан факт влияния 6S-1 и 6S-2 РНК на биосинтез сурфактина в клетках B. subtilis. Для уточнения механизма этого влияния будут проведены дополнительные эксперименты. Работа выполнена при финансовой поддержке РНФ, проект №24-24- 00193.